不同ω-3PUFA含量对绍兴鸭肝脏和脾脏中INF-γ和IL-2基因表达影响的研究

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多不饱和脂肪酸(PUFA)是一种重要的营养物质,是所有细胞膜的重要组成成分,具有重要的生理功能。尤其ω-3 PUFA同维生素、矿物质一样是人体的必需营养物质,摄入不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。细胞因子是由细胞产生的小分子可溶性蛋白质,影响这些细胞及其他细胞的行为和特征。基于细胞因子的重要作用,自发现后,一直是学者们的研究热点。尤其是INF-γ和IL-2,对于其基因结构、基因工程及体外重组表达的研究已取得了重要突破。本研究选用300日龄商品代绍鸭作为动物模型,研究了日粮ω-3 PUFA对脾脏和肝脏中INF-γ、IL-2 mRNA表达的影响;以及在2%亚麻油饲料中添加不同比例的抗氧化剂VE、二氢吡啶及其复合物对两个基因在脾脏和肝脏中的mRNA表达情况的影响;建立并优化了INF-γ、IL-2mRNA表达的实时荧光定量RT-PC方法;从分子方面阐明了ω-3 PUFA及不同抗氧化剂对绍鸭免疫的影响机理。为研究揭示饲料中ω-3 PUFA在家禽中的生物学特性及其对免疫的影响奠定基础。主要实验结果如下:试验一:(1)饲料中添加1%亚麻油的第2组脾脏INF-γ分子mRNA表达水平极显著(P<0.01)高于对照组,添加2%亚麻油的第3组表达水平与对照组差异显著(P<0.05),但添加3%亚麻油的第4组却与对照组不显著(P>0.05)。在添加不同比例亚麻油的三个试验组之间,随着亚麻油含量的提高,也即ω-3PUFA含量的增加,INF-γ分子mRNA表达水平呈下降趋势,但三组之间差异不显著(P>0.05)。(2)INF-γ分子在肝脏中mRNA表达水平相继增加。其中第4组与对照组差异极显著(P<0.01),与第2组差异显著(P<0.05),但与第3组差异不显著(P>0.05)。而且第2、3组与对照组差异均不显著(P>0.05)。(3)饲喂不同比例(1%、2%和3%)亚麻油饲料对IL-2分子在脾脏中mRNA表达水平无显著差异(P>0.05)。(4)对IL-2分子在肝脏中相对mRNA表达水平都显著(P<0.05)提高但有下降趋势,其中第2、4组与对照组呈极显著(P<0.01)关系,但第三组与第一组却差异不显著(P>0.05),第3组与第2、4组差异极显著(P<0.01),第2组与第4组之间差异不显著(P>0.05)。试验二:(1)饲喂含有以2%亚麻油为ω-3 PUFA饲料源并添加不同量的维生素E、二氢吡啶及其复合物的饲料,各组脾脏中INF-γ基因mRNA相对表达量都显著(P<0.05)高于对照组,其中第3组与对照组差异极显著(P<0.01),其余各组都是差异显著(P<0.05),而第3组与第4组间差异不显著(P>0.05),与第二组及添加2%亚麻油组之间差异显著(P<0.05)。(2)2、3、4各组肝脏INF-γ基因的表达都极显著(P<0.01)高于对照组,但添加2%亚麻油组却与对照组差异不显著(P>0.05)。第2、4组与添加2%亚麻油组差异显著(P<0.05),第3组却与2%亚麻油组差异极显著(P<0.01)。(3)饲喂不同饲料对绍鸭IL-2在脾脏中的相对表达,除了第3组与对照组差异显著(P<0.05)外,其他各组与对照组差异都不显著。添加2%亚麻油组和第4组虽然相对表达量有所提高,但不明显,其余的两组相对表达量都呈下降趋势,其中第3组与对照组呈显著关系(P<0.05),而且第3组与第4组、添加2%亚麻油组呈极显著(P<0.01),第2组与添加2%亚麻油组、第4分别呈显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)。(4)在肝脏中IL-2 mRNA表达除了第3组与对照组差异极显著(P<0.01)外,其他各组与对照组差异均不显著(P>0.05),第3组与第4组差异显著(P<0.05),但第3组与第2组及添加2%亚麻油组差异不显著,但在表达量上偏高。本研究表明随着饲料中添加亚麻油含量的逐渐提高,脾脏中的INF-γ基因相对与饲喂基础日粮的对照组mRNA表达水平逐渐下降,其中以添加1%水平最高,但在肝脏中表达量逐渐升高,以3%的添加组表达量最高。而对IL-2在脾脏中的表达影响不显著,在肝脏中的表达水平都极显著提高,但呈下降趋势。在含2%亚麻油的饲料中添加不同抗氧化剂VE、二氢吡啶及其复合物,以添加二氢吡啶对INF-γ、IL-2在脾脏中mRNA表达水平影响最大,其中INF-γ表达量最高,IL-2最低。在肝脏中也是以二氢吡啶添加组影响最高,且INF-γ、IL-2 mRNA表达量都比对照组和2%亚麻油组高。
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