研究目的:肺癌作为发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其5年生存率不足20%。肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）是肿瘤微环境中的重要组成部分,大部分CAFs由肿瘤细胞诱导成纤维细胞转化而来,在癌症的发生发展中起着关键促进作用。针对肿瘤细胞对微环境的重塑机制制定靶向治疗策略,将有效提升患者的生存时间。本研究从生物信息学、分子生物学和细胞生物学层面探讨肿瘤细胞miRNA的异常表达对于促成纤维细胞重塑的作用及分子机制。研究方法:1.采用生物信息学研究方法筛选与CAFs相关的关键miRNA,并用实时定量荧光PCR（q PCR）验证miR-30d-5p在肿瘤细胞及支气管上皮细胞中的表达情况;2.运用q PCR、蛋白印迹（WB）和免疫荧光（IF）技术验证miR-30d-5p的异常表达与肿瘤细胞诱导正常相关成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）转化的关系;3.使用生物信息学、RNA-seq、q PCR、WB探索miR-30d-5p对肿瘤细胞中TGFβ通路的调控;4.利用RNA-seq、Double luciferase reporter gene assay、q PCR、WB、IF研究miR-30d-5p通过非经典激活Hedgehog-GLI2通路的分子机制;5.结合位点预测和Double luciferase reporter gene assay探讨转录因子GLI2与TGFβ1的调控关系。研究GLI2调控TGFβ1在肺腺癌细胞中的表达,从而影响成纤维细胞的转化。研究结果:1.miR-30d-5p在CAFs富集肿瘤中低表达,正常细胞中高表达,并与预后相关;2.抑制正常肺上皮细胞中的miR-30d-5p导致肿瘤细胞诱导NAFs转化为CAFs,而LUAD细胞系中过表达的miR-30d-5p可以抑制NAFs转化为CAFs;3.miR-30d-5p缺失促进了TGFβ1的上调,此外,miR-30d-5p通过TGFβ1促进了CAFs的转化;4.miR-30d-5p通过非经典途径直接抑制GLI2并调控TGFβ1表达,同时,miR-30d-5p通过GLI2影响成纤维细胞的转化;5.TGFβ1是转录因子GLI2的下游靶基因,介导GLI2促成纤维细胞的转化效应。研究结论:肺腺癌细胞中低表达的miR-30d-5p可以非经典激活GLI2调控TGFβ1促进肿瘤微环境中成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞的转化。