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目的:建立八珍方中不同药味的薄层色谱鉴别方法;采用UPLC-HRMS技术对八珍方中化学成分进行定性分析,确定其主要化学成分,阐明其物质基础;采用UPLC-QqQ-MS技术对八珍方不同提取部位中酚类成分进行定量分析,确定其酚类成分的含量;通过建立体外抗氧化和降糖评价模型,对八珍方不同提取部位进行活性评价研究,并将定量分析和活性评价结果进行相关分析,确定八珍方中可能的药效成分;对确定的药效成分建立HPLC含量测定方法。方法:（一）八珍方薄层色谱鉴别研究:运用薄层色谱法对八珍方中药流浸膏中九味组成中药进行鉴别。（二）基于超高效液相色谱-Q Exactive轨道阱高分辨质谱（UPLC-HRMS）的八珍方中化学成分的定性分析研究:采用UPLC-HRMS技术,对八珍方中药流浸膏中复杂化学成分进行快速定性分析,借助数据库自动及手动匹配,在正、负离子模式下鉴别八珍方中的化学成分,根据化合物质谱的碎片离子信息,结合对照品和相关文献报道进一步验证所鉴定成分,并对化学成分来源的药材进行归属,阐明该方物质基础。（三）基于超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱（UPLC-QqQ-MS）的八珍方不同部位中34种酚类成分的定量分析研究:采用UPLC-QqQ-MS技术,对八珍方石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部位提取物中34种酚类成分进行含量测定,明确其中主要成分的含量,为八珍方活性及相关分析研究提供数据支持。（四）八珍方不同部位抗氧化和降糖活性及相关分析研究:采用DPPH、ABTS和FRAP三种测定方法,分别以维生素C、维生素E、FeSO4为阳性对照研究八珍方石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部位提取物的抗氧化特性;并以阿卡波糖为对照,通过α-葡萄糖苷酶抑制活性研究八珍方不同部位提取物的降糖特性;结合酚类成分定量结果和活性评价结果进行相关分析,确定八珍方中可能的抗氧化和降糖药效成分。（五）八珍方中10种主要酚类成分的含量测定研究:根据相关分析结果,对具有较高含量和较高生物活性的10种酚类成分建立HPLC含量测定方法。结果:（一）建立了方中山楂、山药、白术、茯苓、白扁豆、麦芽、薏苡仁、芡实和莲子九种药味的薄层鉴别项,三个批次供试品和对照药材在薄层色谱上显相同斑点,阴性样品无干扰,且薄层色谱图特征性明显、分离度较优。（二）采用UPLC-HRMS技术,鉴别出八珍方中167种化学成分,包括13种有机酸和酚酸类、55种黄酮类、13种酚及酚苷、45种生物碱和含氮类、8种萜类、11种糖苷类、8种脂肪酸类、7种内酯类、4种炔类和3种呋喃类成分,其中45个成分经对照品比对而准确鉴定,所鉴别出的化合物能够很好地表征八珍方的化学物质基础。（三）UPLC-QqQ-MS法测定了八珍方四种提取物中34种酚类化合物的含量,包括15种酚酸和19种黄酮类化合物;石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和剩余水部位的34种酚类成分的总干重含量分别为759.68、29721.20、3217.73和52.90μg/g,以乙酸乙酯提取物的总干重含量最高;在乙酸乙酯提取物中检测出32种酚类化合物,其中26种酚类化合物的含量明显高于其他三种提取物,并以没食子酸的含量最高;在正丁醇和水提取物中分别检测出26、18种酚类化合物,以绿原酸的含量最高;在石油醚提取物中检测到16种酚类化合物,以香草酸的含量最高;在八珍方四种提取物中检测到的三个最丰富的酚酸类化合物分别是没食子酸、绿原酸和洋蓟素,其干重含量范围分别为0.216803.92、15.712278.70和0.423225.25μg/g,三个最丰富的黄酮类化合物分别是金丝桃苷、牡荆素和槲皮素,其干重含量范围分别为0.133147.02、0.64300.58和1.36214.89μg/g,并且含量最丰富的三种酚酸和黄酮同样在乙酸乙酯提取物中含量最高。结果证实,在四种溶剂中,乙酸乙酯是从八珍方中药流浸膏中提取酚类化合物的最佳提取溶剂。（四）八珍方四种提取物均表现出抗氧化活性,但不同极性的提取物表现出显著的差异性,其中乙酸乙酯提取物表现出最强的抗氧化活性（DPPH,1.12 mmol AAE/g;ABTS,2.06 mmol TE/g;FRAP,1.62 mmol FSHE/g）,其次是石油醚提取部位（DPPH,0.27 mmol AAE/g;ABTS,0.24 mmol TE/g;FRAP,0.26 mmol FSHE/g）,正丁醇提取部位（DPPH,0.20 mmol AAE/g;ABTS,0.31 mmol TE/g;FRAP,0.22 mmol FSHE/g）和剩余水部位（DPPH,0.029 mmol AAE/g;ABTS,0.066 mmol TE/g;FRAP,0.043 mmol FSHE/g）。与抗氧化生物活性相似,所有提取物均显示出显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性,乙酸乙酯提取物具有最强的抑制活性（3.73 mmol ACAE/g）,其次是石油醚（0.50mmol ACAE/g）,正丁醇（0.10 mmol ACAE/g）和水（0.015 mmol ACAE/g）。相关分析结果显示,共有22种酚类化合物与抗氧化活性具有显著的相关性（P<0.05或P<0.01）,其中共有21种酚类化合物与三种抗氧化活性均显示出显著相关性。与抗氧化生物活性相似,共有22种酚类化合物与α-葡萄糖苷酶抑制活性具有显著的相关性（P<0.05或P<0.01）。结合八珍方酚类成分含量测定、活性评价结果及文献报道,牡荆素、荭草苷、绿原酸及其异构体具有较高的含量和较高的生物活性,应被视为八珍方抗氧化和降糖活性潜在的质量标志物。（五）运用HPLC法对3个批次八珍方中药流浸膏中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、异牡荆素、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C进行含量测定,含量的平均值分别为0.150、0.242、0.109、0.011、0.017、0.018、0.024、0.127、0.216和0.220 mg/mL,RSD范围为3.99.1%,不同批次含量差异较小,所建立方法可为八珍方质量控制提供科学的实验依据。结论:本研究首次提供了八珍方薄层鉴别、化学成分和抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性的数据;建立了八珍方中九味中药的薄层鉴别项;定性鉴别八珍方中167种化学成分,其中45个成分经对照品比对而准确鉴定;定量测定八珍方四种提取物中34种酚类成分的含量,乙酸乙酯提取物中26种酚类化合物的含量最高;乙酸乙酯提取物表现出最强的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,其次是石油醚、正丁醇和水提取物;相关分析显示共有22种酚类成分与抗氧化、降糖活性具有显著相关性,其中牡荆素、荭草苷、绿原酸及其异构体可作为本方的潜在质量标志物,并同时对这些活性成分建立HPLC测定方法;这些结果可为八珍方的进一步研究和应用提供实验基础。