硫氧化还原蛋白在胰腺癌及癌旁组织中的表达及意义

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背景胰腺癌是人体常见的恶性肿瘤之一,近年来发病逐年增多。胰腺癌的病程短,进展快,早期无明显或特异的症状和体征,临床诊断时大多属晚期,具有高度侵袭性,多存在邻近器官和血行转移,预后极差。尽管手术技术不断改进,术后支持不断完善以及辅助性化疗和放疗的配合应用,但绝大多数胰腺癌患者仍死于癌症。通常一年生存率不到10%,五年生存率不到1%,中位生存期仅为3~4个月,对放疗不敏感,对当前化疗的反应性极差,单药化疗近期疗效低于10%。目前急需寻找新的更为有效的治疗方法,以解决这些难题。氧化还原过程与细胞生长和正常行使功能密切相关。自从发现硫氧还蛋白以来,越来越多的证据表明,硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶以及NADPH一起协同作用,组成一个广谱的蛋白二硫键还原体系,在稳定细胞内氧化还原环境、保持细胞免受有害的氧化压力的刺激以及调节蛋白-蛋白、蛋白-核酸相互作用等方面起重要作用。而且,细胞的氧化还原状态与一些疾病的发生(如艾滋病、肿瘤、缺血性疾病)密切相关。在人类的多种肿瘤中均存在硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶的异常表达,对于肿瘤发生机制的研究及抗癌药物的开发,硫氧化还原系统提供了一个颇有吸引力的靶标,成为国际上研究的热点。实验方法采用RT-PCR检测胰腺癌及癌旁组织中Trx-1的mRNA含量,采用Western blotting检测胰腺癌及癌旁组织中Trx-1的蛋白表达量。统计学处理用SPSS13.0软件完成,计量资料数据表示方式以平均值±标准差(Mean±SD),两组计量资料采用非独立样本t检验,各组指标间的相关性采用Spearman等级相关分析。P<0.05为差异有统计学显著性意义。结果Western blotting:30例癌组织24例中Trx-1过表达,23例癌旁组织Trx-1低表达。采用Kodak DNA Analysis 1D图像分析软件进行光密度分析,读取癌及癌旁组织Trx-1目的条带和β-actin目的条带的光密度值,分别计算Trx-1表达量RI值,RI=Trx-1条带光密度值/β-actin条带光密度值。使用t检验进行Trx-1在癌及癌旁组织中的表达量比较。24例胰腺癌组织光密度值(0.81±0.10)明显高于癌旁组织光密度值(0.30±0.11)(P=0.000)。胰腺癌组织中Trx-1表达量与分化程度无关,高分化与中低分化无显著性差异(P=0.08)。而与肿瘤TNM分期有关,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织的Trx-1表达量有显著性差异(P=0.003)。RT-PCR:30例癌组织26例中Trx-1过表达,25例癌旁组织Trx-1低表达。采用Kodak DNA Analysis 1D图像分析软件进行光密度分析,读取癌及癌旁组织Trx-1和β-actin目的条带的光密度值,分别计算Trx-1 mRNA指数RI,RI=Trx-1 mRNART-PCR产物光密度值/β-actin mRNA RT-PCR产物光密度值。RI反映Trx-1 mRNA在癌及癌旁组织的相对表达强度。使用t检验进行Trx-1 mRNA在癌及癌旁组织的表达量比较。26例胰腺癌组织RI值(0.80±0.08)明显高于癌旁组织RI值(0.39±0.15)(P=0.000)。胰腺癌组织中Trx-1 mRNA表达量与分化程度无关,高分化与中低分化的RI值无显著性差异(P=0.40)。与TNM分期有关,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织的Trx-1 mRNA表达量有显著性差异(P=0.000)。结论硫氧化还原蛋白在缺氧和氧化应激环境下促进肿瘤细胞存活和胰腺癌的进展,在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的介导作用。
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