pTAC10参与调控拟南芥PEP依赖的叶绿体基因表达的分子机理研究

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染色体转录激活复合物(TAC)参与调控叶绿体基因的表达。拟南芥TAC复合物中约有35个成员,其中部分成员的功能尚不清楚。本文中研究的pTAC10蛋白质是其中之一,具有S1结构域和多个可能被磷酸化的位点。pTAC10是一个定位在叶绿体中的蛋白质,其突变体为白化表型,且是幼苗致死。该基因的缺失导致了拟南芥叶绿体在发育的早期无法形成正常的类囊体,说明该基因对于叶绿体早期的发育是必需的。蛋白质免疫实验表明,突变体中多数光合作用蛋白质复合物的组分缺失或积累明显下调。实时定量RT-PCR和Northern杂交结果显示,该突变体中PEP依赖的基因的表达明显下调,这说明该基因与质体基因的表达相关。另外,通过酵母双杂交实验,我们找到了pTAC10蛋白在TAC复合物中的相互作用蛋白Trxz,并确定了pTAC10蛋白的有效相互作用区域。体外磷酸化实验证明pTAC10是酪氨酸蛋白激酶Ⅱ(CK2)的作用底物,部分磷酸化位点突变的互补植株呈现白化表型。综上所述,pTAC10对叶绿体发育是必须的,它的缺陷导致叶绿体早期的生物发生受阻。pTAC10蛋白与TAC复合物另一成员间之间存在相互作用,共同调控质体基因的表达。同时,pTAC10是叶绿体磷酸化调控PEP活性的途径中关键的成员对拟南芥中PEP依赖的叶绿体基因的转录有重要作用。
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