5-氟尿嘧啶海藻酸钠纳米粒子的制备

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纳米粒子作为一种新型的药物载体被认为具有广阔的应用前景。但是纳米粒子载体常面临制备工艺和生物安全性的问题。本研究以简单有效的方法成功制备了纳米粒子药物传递系统,避免了有潜在毒性的溶剂和化合物的使用,以化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)为模型药物,用卵磷脂乳化,海藻酸钠为载体,CaCl2固化,然后制备出了 5-Fu海藻酸钠纳米粒。为确定5-Fu海藻酸钠纳米粒的处方组成,在前期研究的基础上以包封率为主要评价指标,进行单因素考察,最终确定对包封率影响最大的因素为5-Fu浓度、海藻酸钠浓度、氯化钙用量及搅拌速度,以包封率为指标优化处方,最终确定5-Fu海藻酸钠纳米粒的最佳处方组成为5-Fu浓度为4.0mg/mL,海藻酸钠浓度为0.7mg/mL,CaC12的用量为10mL,搅拌速度为1200rpm。本研究对5-Fu含量测定的分析方法进行了改进,采用高效液相色谱法提高检测的准确度,并考察了该方法的精密度、稳定性和回收率,并且对按最佳处方制备的5-Fu纳米粒进行了质量评价,测定其包封率和载药量、粒子形态、粒径大小和体外溶出度。方法学考察结果表明高、中、低浓度的精密度RSD值分别为0.75%、0.53%和0.82%,稳定性的RSD值为0.68%,回收率的RSD值为1.27%,说明该方法简便、快速、准确度高,能较好的定量分析5-Fu。按最佳处方制备的5-Fu海藻酸钠纳米粒包封率为56.29±4.35%,载药量为8.69±2.66%,冷冻干燥后的纳米粒可在15 min内乳化完全,纳米粒子呈圆球形或椭圆形,分布比较均匀,粒径在300nm左右,在2天内累积释放度接近 90%。在冷冻干燥制品当中常用的冻干保护剂有甘露醇、葡萄糖、蔗糖等。从冻干保护剂处方筛选的结果可知,不添加冻干保护剂的处方冷冻干燥后冻干样品突起,不能成形,且分散性不好;冻干保护剂浓度越高,冻干样品的外观变得不够整齐,可能是由于高浓度的冻干保护剂在冷冻干燥环境下发生了变化造成。其中以甘露醇作为保护剂,浓度控制在2%,其冻干品的外观等指标均较符合要求。由于5-Fu主要用于胃肠道肿瘤的治疗,所以选择胃癌细胞株SGC-7901为研究对象,赛唑蓝(MTT)比色法考察5-Fu海藻酸钠纳米粒子对细胞的抑制作用。结果表明,5-Fu纳米粒子对细胞的抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性,纳米粒子浓度越高,在48小时内作用时间越长,对细胞的抑制作用越强。该研究结果表明纳米粒子可用于作为化疗药物的潜在载体
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