UPLC-MS/MS法检测氯霉素类药物

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:junemeng
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氯霉素类抗生素包括氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考三种。作为广谱抗菌药,氯霉素类药物被广泛的运用于动物细菌性疾病的治疗与预防。但长期使用易在动物体内造成残留,危害人类的健康。因此本试验运用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)作为检测仪器,建立饲料和黄鳝中氯霉素类药物的检测方法,从而对氯霉素类药物的使用以及残留情况进行有效监控。主要结论如下:1饲料中氮霉素类药物UPLC-MS/MS检测标准的建立本研究建立配合饲料、浓缩料和预混料中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考超高效液相色谱-串联质谱的检测方法。饲料粉碎后,经碱性乙酸乙酯提取,正己烷去除脂肪,Sep-Pak C18固相萃取柱净化,药物的监测模式采用负离子多反应监测,内标法定量。结果显示,三种氯霉素类药物在1~20μ·L-1浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99,方法检测限为0.3μg.kg-1,定量限为1 μg·kg-1,1、2和5 μg·k-1添加水平的平均回收率为81.41%~112.88%,日内精密度为1.24%~12.92%,日间精密度为0.64%~13.09%。该检测方法经江苏省兽药饲料质量检验所、天津市兽药饲料监察所以及安徽省兽药饲料监察所三家单位的复核验证。验证结果表明该方法线性良好,1、2和5 μg·kg-1加标浓度的回收率数据均能达到60%-120%,日内、日间精密度在20%以内,方法灵敏度及重现性良好。2黄鳝肌肉中氯霉素类药物UPLC-MS/MS检测方法的建立本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法来检测黄鳝肌肉中残留的氯霉素类药物。使用碱性乙酸乙酯提取,同时加入无水硫酸钠去除组织中的水分,加入氯化钠提高液液萃取效率。待测物在1~20μg·L-1范围内线性良好,三种药物的检测限低至0.1μg·kg-1,定量限0.3μg kg-1。黄鳝肌肉中氯霉素在0.3、0.45和0.6μg kg-1添加水平的回收率为92.83%~111.26%;甲砜霉素在25、50和75 μg·kg-1添加水平的回收率为86.76%~107.30%;氟苯尼考在50、100和150 μg·kg-1添加水平的回收率为96.21%~104.14%。本方法对三种药物的平均提取回收率均为86.76%~111.26%,日内精密度为2.16%~13.66%,日间精密度为1.42%~8.06%。本试验简化提取步骤,减少固相萃取这一过程,在保证回收率的基础上有效提高分析效率,降低检测成本.
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