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农药一般分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂等。嘧霉胺、啶氧菌酯属于杀菌剂,异丙隆属于除草剂,赤霉素属于植物生长调节剂。它们常被施于农作物上用来防治病虫害或者调控植物生长。在实际农业生产中,不遵守休药期或过量使用,极易导致粮食和农产品中的农药残留,给人们的健康带来极大的危害。因此,开发现场、快速检测方法是指导农药规范使用的重要途径。间接竞争酶联免疫分析（ic-ELISA）和免疫层析试纸条分析（ICS）方法具有操作简单、成本低、灵敏度高、时间短等优点。本论文以嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆、赤霉素四种农药为目标,成功开发了免疫快速检测方法,并应用于实际测定。首先,根据嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆及赤霉素的结构特点,开展了结构改造,制备半抗原,再分别与载体蛋白偶联合成了各自的完全抗原,免疫小鼠,利用杂交瘤细胞技术,筛选获得了特异性的单克隆抗体。嘧霉胺抗体1E7、啶氧菌酯抗体3C2、异丙隆抗体3G9、赤霉素抗体4H11四种单克隆抗体的亲和常数分别为5.54×109 L/mol、2.42×1010L/mol、4.49×109 L/mol、1.90×109 L/mol。对待测液的有机溶剂（甲醇含量）、pH和离子强度（NaCl含量）进行优化,在最优条件下,四种农药:嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆、赤霉素的单克隆抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为4.00 ng/mL、0.10 ng/mL、1.94 ng/mL、71.48 ng/mL;线性范围(IC20～IC80)分别是1.20～15.53 ng/mL、0.04～0.25 ng/mL、0.46～8.19ng/mL、21.76～234.87 ng/mL。嘧霉胺1E7、啶氧菌酯3C2、异丙隆3G9与结构类似物交叉率小于5%。而赤霉素4H11与结构类似物赤霉素A1、赤霉素A3、赤霉素A4、赤霉素A7交叉率分别为:6.8%、5.8%、4.5%、3.5%。即四种单克隆抗体的交叉率均小于10%,特异性良好。以制备的单克隆抗体和完全抗原为基础,以黄瓜为检测基质,通过添加回收实验,评估ic-ELISA检测方法。在20.0 ng/g、40.0 ng/g、80.0 ng/g的添加水平下,嘧霉胺标准品回收率在96.6%～99.7%之间,变异系数在1.1%～1.8%之间;在0.5 ng/g、1.0 ng/g、2.0ng/g的添加水平下,啶氧菌酯标准品回收率在95.2%～98.5%之间,变异系数在1.5%～6.5%之间;在10.0 ng/g、20.0 ng/g、40.0 ng/g的添加水平下,异丙隆的标准品回收率在84.9%～97.4%之间,变异系数在1.5%～5.0%之间;在50.0 ng/g、100.0 ng/g、200.0 ng/g的添加水平下,赤霉素的标准品回收率在92.7%～99.9%之间,变异系数在3.3%～4.5%之间。进一步通过优化金标抗体浓度、喷膜抗原浓度等,分别研制了嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆、赤霉素的免疫层析试纸条。实验结果表明,黄瓜样品中嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆、赤霉素的消线值分别为50 ng/g,100 ng/g,25 ng/g,200 ng/g。综上,本论文成功建立了嘧霉胺、啶氧菌酯、异丙隆、赤霉素的酶联免疫检测方法和免疫层析试纸条分析方法,实现了农产品中四种农药残留的快速检测,满足实际需求。