目的:通过研究抑癌基因PTEN在结肠癌中的表达,研究PTEN在结肠肿瘤中的表达情况与肿瘤分期、分化程度及转移的关系。构建人野生型PTEN基因真核表达载体,观察PTEN基因对结肠癌LoVo细胞的抑制作用,并初步探讨其对肿瘤抑制作用的机制。方法:应用免疫组织化学方法检测PTEN在结肠癌组织中的表达。采用巢式PCR方法构建真核表达载体并鉴定。将重组质粒转染入PTEN缺失的结肠癌LoVo细胞中,观察PTEN基因在体外对结肠癌LoVo细胞的抑制作用。结果:在正常结肠粘膜中,PTEN呈强阳性表达,在结肠癌组织中,PTEN蛋白表达下降,其分布及着色程度呈异质性,其中高分化腺癌尚有部分表达,低分化腺癌及转移癌表达明显下降,有的甚至无表达。酶切图谱及序列测定重组质粒与GeneBank中公布的序列完全一致。PTEN基因在体外能够诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制结肠癌细胞增殖。结论:证实在结肠癌组织中,PTEN蛋白表达下降,其分布及着色程度呈异质性,其中高分化腺癌尚有部分表达,低分化腺癌及转移癌表达明显下降,有的甚至无表达,成功构建了人野生型PTEN基因真核表达载体,用脂质体介导法将重组质粒成功转染入LoVo细胞,经检验PTEN基因整合入转染细胞并稳定表达。证实人野生型PTEN基因在体外有抑制肿瘤细胞的增殖作用。通过Westernblot检测PTEN蛋白、Phospho-Akt蛋白,证实野生型PTEN基因能够下调Phospholated Akt的表达水平,提示PTEN基因对结肠癌细胞系LoVo的抑制作用的机制之一是PTEN能够阻断PI3K/AKT途径。