单油酸甘油酯基抗菌立方液晶的制备及抗菌性能研究

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目的:分别将黄藤素和纳米银载入单油酸甘油酯基立方液晶中,制备能够长效释放和pH响应性释放的抗菌凝胶。方法:(1)使用紫外-可见分光光度法对黄藤素水溶液进行表征;采用还原法制备纳米银,使用透射电子显微镜、紫外-可见分光光度法和动态光散射对纳米银进行表征。(2)采用融化的单油酸甘油酯和黄藤素的混合物吸水制备载黄藤素立方液晶;采用融化的单油酸甘油酯/CTAB/Ag NP混合物吸水制备载纳米银的立方液晶。(3)抗菌立方液晶的表征:微观结构通过透射电子显微镜观察;结构随温度变化通过偏光显微镜镜检观察;升温吸热曲线通过差示扫描量热法来观察。(4)采用培养基扩散法定性表征抗菌立方液晶对S.aureus和E.coli的抗菌性能;通过体外释放的定量分析进一步明确黄藤素和纳米银的溶出性能。结果:(1)通过制备不同浓度黄藤素水溶液测定其在200-800nm紫外-可见吸收光谱图,选取342nm处的吸光度建立黄藤素浓度-吸光度标准曲线;通过还原法在水中制备了均匀分散的纳米银混悬液,在透射电子显微镜下观察到粒径10-20nm的近似球形的均匀分散的纳米银颗粒,DLS测得的纳米银的水合粒径约为70-80nm,Zeta电极测得纳米银表面的电位为-50m V。(2)采用共混法制备了载黄藤素的GMO胶:Gel(2.5%w)、Gel(1.0%w)、Gel(0.25%w)、Gel(0.10%w)、Gel(2.5%o)、Gel(1.0%o)、Gel(0.25%o)、Gel(0.10%o);在表面活性剂CTAB协助下纳米银被包载入立方液晶中,其中CTAB/银的摩尔比从2/0,到2/1。(3)载黄藤素的立方液晶表征:电镜下,无论在水相或是脂相包载的黄藤素,都呈现出晶层结构。偏光显微镜和差示扫描量热法表征载黄藤素立方液晶,可知黄藤素的加入未对立方液晶的相转变产生显著影响。载纳米银的立方液晶表征:从电镜可看出,CTAB能够促使纳米银均匀的分散在立方液晶的晶层中并不影响晶层结构。通过偏光显微镜和差示扫描量热法表征载纳米银立方液晶,可知CTAB和纳米银的加入未对立方液晶的相转变产生显著影响。(4)载黄藤素的立方液晶体外释放和抑菌性能:在PBS缓冲液中,黄藤素在Gel(2.5%w)、Gel(1.0%w)、Gel(0.25%w)、Gel(0.10%w);Gel(2.5%o)、Gel(1.0%o)、Gel(0.25%o)、Gel(0.10%o)的7d释放度分别为36%、32%、28%、18%;52%、40%、22%、12%。而对照组Ctrl(2.5%w)、Ctrl(1.0%w)、Ctrl(0.25%w)、Ctrl(0.10%w);Ctrl(2.5%o)、Ctrl(1.0%o)、Ctrl(0.25%o)、Ctrl(0.10%o)在4h的释放度达到72%、73%、73%、75%;72%、72%、75%、78%且维持不变。表明将黄藤素包载入立方液晶后,能防止黄藤素的突释,并延长黄藤素的释放周期至7d。培养基扩散试验观察到载黄藤素的立方液晶对S.aureus和E.coli的抑菌圈大小随浓度增加而增大,且溶液组较立方液晶组的抑菌圈明显大得多。载纳米银的立方液晶抑菌性能和体外释放:培养基扩散试验证实,载纳米银的立方液晶可释出银且对E.coli和S.aureus具有抑菌作用,且抑菌圈大小随着立方液晶脂相中纳米银包载量增多而增大。在pH为3.0的环境中银从Gel(2/1)组立方液晶中释放量为13.0%,远高于同组立方液晶在pH 5.0和pH 7.4的环境下释放量(分别为3.8%,0.1%)。结论:(1)成功将黄藤素载入单油酸甘油酯立方液晶中。黄藤素包载入立方液晶后,能防止黄藤素的突释,并延长黄藤素的释放周期至7d,且对S.aureus和E.coli有良好的抑菌作用。这一特性能够弥补黄藤素片剂释放不稳定、浓度过高的问题,有望被应用于载药领域。(2)成功将纳米银包载入立方液晶脂相中,制备的立方液晶对S.aureus和E.coli随纳米银浓度增加而抑菌作用增强,且纳米银的释放遵从pH响应释放,pH为3时能够显著释放。立方液晶在刺激响应性抗菌载体方向展现出潜在的应用价值。
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