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目的观察右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠肺组织病理改变、肺组织炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(Interleukin-6,IL-6)含量、肺组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、磷酸化蛋白激酶B(protein kinase b phosphorylation,p-Akt)、整合素β1蛋白表达水平及胶原沉积的影响;探讨DEX抗SD大鼠ARDS早期肺纤维增生作用及可能的机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为三组(n=18):对照组(Ct组)、脂多糖组(LPS组)、脂多糖+右美托咪定组(DEX组),各组分为1、3、7天三个观察点,每个观察点6只大鼠;LPS组、DEX组气管内雾化吸入LPS 5 mg/kg,Ct组予等容量生理盐水雾化吸入,吸入结束后DEX组腹腔注射DEX 25 ug/kg,每天追加1次直至不同观察点(1、3、7d),不同观察点的LPS、Ct组则在相应时点予等容量生理盐水腹腔注射;大鼠腹腔注射10%水合氯醛0.3 ml/100 g经腹主动脉取血后处死大鼠,留取肺组织标本;HE染色法观察肺组织病理改变;Masson染色法检测肺组织纤维化分布及含量;免疫组织化学法观察肺组织α-平滑肌收缩蛋白(α-smooth muscle contractile proteins,α-SMA)表达水平;ELISA法检测肺组织匀浆液TNF-α、IL6、羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)及胶原Ⅰ型(collagenⅠ,ColⅠ)含量;免疫印迹法(Western-blotting)测肺组织TLR4、整合素β1蛋白表达及p-Akt磷酸化水平。结果1.肺组织病理:HE染色显示Ct组肺泡均匀一致,肺泡壁光滑,肺泡间隔完整;LPS组第1d即观察到:肺泡间隔增宽,肺泡腔和间质组织水肿,部分肺泡腔萎陷及肺泡断裂;第3d肺泡间隔进一步增宽,并有大量炎症细胞浸润和红细胞渗出,肺泡间隔可见纤维母细胞增生;第7d肺泡结构紊乱、肺泡间隔断裂并增厚,间隔可见大量细胞增生并有纤维板形成。dex组第7d肺组织只见到少量炎性细胞浸润、肺泡间隔增宽且肺间质水肿较轻,只有少量纤维母细胞增生,肺泡结构较为完整。masson染色显示ct组肺泡间隔组织只见到少量绿染;lps组第1d即观察到肺泡间隔组织绿染现象增多,第3d肺泡间隔组织绿染现象进一步增多,呈小片状;第7d肺泡间隔组织绿染呈片状、块状融合;dex组7d肺泡间隔组织绿染现象减少,呈小片状。图像分析系统进行肺组织胶原容积分数分析:lps可呈时间依赖性促进大鼠肺组织胶原增加,与ct组相比,lps诱导1d肺组织胶原容积分数即显著增高(p<0.05),3、7d肺组织胶原容积分数进一步增加(p<0.01);dex能明显抑制lps诱发大鼠肺组织纤维化,与lps组7d相比,dex组7d肺组织胶原容积分数显著降低(p<0.05)2.elisa结果示:与ct组相比,大鼠吸入lps1d肺组织tnf-α、il-6水平均显著增加(p<0.01)并达到峰值,随后逐渐下降,但第3、7d肺组织tnf-α、il-6的水平仍明显高于ct组(p<0.01)。与lps组相比,dex组各观察点大鼠肺组织tnf-α、il-6水平均明显降低(p<0.05)。3.westernblot结果示:与ct组相比,大鼠吸入lps1d肺组织tlr4、整合素β1蛋白及p-akt磷酸化水平即明显增加(p<0.05),p-akt磷酸化水平第3d时达到峰点,而tlr4,整合素β1第3、7d表达进一步增加,各时间akt蛋白水平未见明显变化(p>0.05);与lps组7d相比,dex组7dtlr4、整合素β1蛋白及p-akt磷酸化水平均明显降低(p<0.05)。4.肺组织均浆液elisa结果示:与ct组相比,lps组各观察点肺组织hyp、colⅠ水平均明显增加(p<0.05);与lps组7d相比,dex组7dhyp、colⅠ水平均明显降低(p<0.05)。5.肺组织免疫组化结果示:与ct组相比,lps组7d肺组织α-sma水平均明显增加(p<0.01);与lps组7d相比,dex组7dα-sma水平均明显降低(p<0.01)。结论1.大鼠气管内雾化吸入lps后肺组织可见炎症反应及早期纤维增生,纤维增生在实验期内呈进行性加重,其病理生理与ards发病过程相符,显示动物造模成功。2.本研究结果表明右美托咪定能抑制LPS诱发的大鼠ARDS炎症反应,减轻早期肺纤维增生。我们推断右美托咪定抗纤维增生机制与其抑制炎症反应、减轻机体氧化应激,加快肺泡上皮修复有关;还可能与抑制TLR4及其下游P13K-Akt信号通路,下调整合素β1,减少肺成纤维细胞活化及胶原蛋白分泌相关。