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菜心(Brassica Parachinensis Bailey)是中国南方的特色蔬菜之一,品质柔嫩,风味独特,被誉为“蔬品之冠”。菜心适应性强,生长迅速,一年四季均可栽培,在蔬菜周年供应上,尤其是淡季供应上占有重要的地位。由于菜心是异交植物,天然杂交率高,在育种中获得一个纯系需要5~6年的时间。若象大白菜、甘兰型油菜那样通过游离小孢子培养的方法获得双单倍体(Double Haploid;DH)植株,可大大缩短纯化菜心品种所需的时间并减少工作量。为加快菜心单倍体育种的步伐,本试验以湖南省农科院蔬菜所提供的4个菜心品种[特早50、9872、青梗菜心和四九菜心(19)]为材料,进行了花药和花粉培养诱导胚状体的试验,结果表明: 1.胚状体的诱导与材料的基因型密切相关,不同基因型之间胚状体诱导频率差异很大。另外,花粉培养的胚状体诱导频率比花药培养的高,但材料的胚状体诱导率在两种培养中呈一致性,在花药培养中诱导率较高的材料在花粉培养中同样表现较高。反之,亦然。 2.用适当浓度的植物生长抑制物质(MET、MH)处理(减数分裂期喷洒植株、低温预处理过程中浸泡花序和加入培养基中),均有利于促进胚状体的产生,提高诱导频率。 3.对于花药培养和花粉培养,采用低温预处理花序(4℃下1~2d)和高温预培养(33℃下1~2d),均能促进胚状体的形成,提高产胚率。 4.在两种培养方式中,培养基中的蔗糖浓度均以13%的培养效果最好。另外,在培养基中加入0.5g/L的AC能改善胚状体的分化,提高诱导率。 5.在花药培养中,培养基中添加适当浓度的AgNO3(100~120mg/L)也能促进胚状体的产生,过量的AgNO3会抑制胚状体的发生。