【摘 要】
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海洋放线菌是海洋微生物的重要组成部分,是产生新活性化合物的重要来源之一。红树林植物因其独特的生境蕴含了丰富的共附生海洋放线菌,成为分离海洋放线菌资源的重要研究对象。相关研究表明,红树林生境来源的放线菌可以产生包括抗菌活性在内的多种活性次级代谢产物。因此,红树林植物来源放线菌资源已成为勘探发现新抗菌药物的重要菌源。本论文从海南西部海岸采集的10份红树林植物样品中分离纯化获得63株放线菌,对其中16株
【基金项目】
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2019年海南省基础与应用基础研究计划（自然科学领域）高层次人才项目（2019RC133;2019RC069）
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海洋放线菌是海洋微生物的重要组成部分,是产生新活性化合物的重要来源之一。红树林植物因其独特的生境蕴含了丰富的共附生海洋放线菌,成为分离海洋放线菌资源的重要研究对象。相关研究表明,红树林生境来源的放线菌可以产生包括抗菌活性在内的多种活性次级代谢产物。因此,红树林植物来源放线菌资源已成为勘探发现新抗菌药物的重要菌源。本论文从海南西部海岸采集的10份红树林植物样品中分离纯化获得63株放线菌,对其中16株代表性放线菌通过16S rRNA序列分析进行鉴定,16株放线菌属于链霉菌属和小单孢菌属。其中,14株放线菌属于链霉菌属,2株放线菌属于小单孢菌属。通过滤纸片扩散法对海洋放线菌的发酵产物进行抗菌活性分析,结果显示,17株放线菌的发酵粗提物具有抗菌活性,其中11株放线菌发酵产物对四种供试细菌中的至少一种供试细菌具有抗菌活性;10株放线菌发酵产物对四种植物病原真菌中的至少一种植物病原菌具有抗菌活性。采用多相分类法对两株海洋放线菌HNM0645和HNM0663进行新种鉴定。菌株HNM0645分离自海南澄迈新兴港红树林植物秋茄。16S rRNA序列分析显示HNM0645为链霉菌属,与已知的链霉菌属物种最高的相似度为99.51%,与亲缘关系最近的模式菌株S.wuyuanensis CGMCC 4.7042T,S.tirandamycinicus HNM0039T,S.spongiicola HNM0071T基因组序列的ANI值分别为90.77%,89.46%,89.36%,均低于原核生物新种鉴定标准的95%～96%。HNM0645细胞壁中含有LL-二氨基庚二酸。全细胞糖组成为半乳糖、葡萄糖、甘露糖。磷脂主要类型包含双磷脂酰甘油,磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇,磷脂酰胆碱。细胞脂肪酸主要类型为iso-C16:0（27.70%）,anteiso-C15:0（17.34%）和anteiso-C17:0（11.74%）。甲基萘醌主要类型为MK-9（H6）（74.90%）,MK-9（H4）（19.20%）和MK-9（H8）（5.90%）。基因组GC含量为71.65mol%。综合鉴定为链霉菌属新种,命名为Streptomyces kandeliae sp.nov.。菌株HNM0663分离自海南澄迈东水港红树林植物海榄雌。16S rRNA序列分析表明HNM0663属于链霉菌属,与模式菌株S.lichenis LCR6-01T的相似度为98.67%,与S.nanningensis YIM 33098T的相似度为98.12%,与S.palmae CMU-AB204T的相似度为97.93%,均低于原核生物新种判定标准的98.70%。HNM0663细胞壁中含有LL-二氨基庚二酸。全细胞糖组成成分为半乳糖、甘露糖。磷脂主要类型包含双磷脂酰甘油,磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇,磷脂酰胆碱。细胞脂肪酸主要类型为iso-C16:0（36.14%）,iso-C15:0（10.85%）和anteiso-C15:0（9.67%）。甲基萘醌主要类型为MK-9（H6）（37.24%）,MK-9（H4）（36.91%）和MK-8（H4）（25.84%）。基因组GC含量为70.98mol%,综合鉴定为链霉菌属新种,命名为Streptomyces avicenniae sp.nov.。利用天然产物分离鉴定技术从新种菌株HNM0645的发酵粗提物中共分离鉴定了4个化合物,其中1个化合物为吲哚咔唑类化合物,3个化合物为蒽环类化合物。化合物CX-01对山药炭疽病原菌和西瓜蔓枯病原菌均有抑菌作用,其EC50值分别为286.61、439.43μg/m L。化合物CX-02对四种供试细菌均有抑菌活性。
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