冷胁迫下紫花苜蓿越冬芽组织结构观察与抗寒基因的研究

来源 :青海大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lvguanghuang
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紫花苜蓿[Medicago sativa L.]作为理想的人工饲草草地栽培品种,可为青藏高原草地畜牧业的发展提供一条可持续发展的新途径。本文通过显微结构观测探索冷胁迫下青大1号紫花苜蓿新品系越冬芽组织结构变化情况;利用基因工程技术获得新品系抗寒基因的全长序列,并对该基因进行鉴定及分析。试验结果表明:随着胁迫时间逐渐延长新品系紫花苜蓿越冬芽组织结构越发紊乱,外表皮出现破裂现象,部分细胞壁结构出现明显变形;在温度达到零下20℃,处理时间24 h时,部分紫花苜蓿越冬芽组织细胞核及细胞器出现解离现象。提取青大1号紫花苜蓿[Medicago sativa L.cv.Qingda No.1]越冬芽总RNA,获得cDNA,根据Genebank中发布的CAS序列设计引物进行PCR扩增,进行原核表达,得到377 bp的片段,该紫花苜蓿CAS包含了一个361 bp的开放阅读框,与紫花苜蓿BudCAR6基因(AF220458.1)同源性为96%,与紫花苜蓿pMSACIB CAS15B(L12462.1)同源性为95%,与扁蓿豆CAS15B(KF208641.1)同源性为90%。推测编码了120个氨基酸。
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