蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化的干预及机制初探

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目的:观察蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝组织肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)以及基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)表达的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制。  方法:健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为6组,正常对照组、肝纤维化模型组、蓝莓原浆低、中、高剂量干预组、复方鳖甲软肝片干预组。肝纤维化模型组及各干预组大鼠给予无菌猪血清腹腔注射(0.5mL/只,每周两次),制备大鼠肝纤维化模型,共12周。造模的同时,蓝莓原浆低、中、高剂量干预组及复方鳖甲软肝片干预组分别给予蓝莓原浆(0.25mL/100g、0.5mL/100g、1.0mL/100g)、复方鳖甲软肝片(0.054g/100g)灌胃,每日一次,共12周。计算各组大鼠肝脏指数;测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和透明质酸(hyaluronic acid HA)水平;检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;并进行肝组织病理学检查(HE染色和Masson染色);实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠肝组织HGF、MMP-9、TIMP-2mRNA及蛋白的表达。  结果:与正常对照组比较,肝纤维化模型组大鼠肝脏指数明显增加(P<0.05);血清ALT、AST水平有所升高,但无统计学意义(P>0.05);肝组织匀浆 SOD活性明显下降(P<0.05),MDA含量明显增高(P<0.05);HE、Masson染色显示有明显肝纤维化(P<0.05),胶原表达明显增多;肝组织HGF、MMP-9、TIMP-2mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。与肝纤维化模型组比较,各干预组大鼠血清ALT、AST水平有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);肝脏指数明显减少(P<0.05);蓝莓原浆中、高剂量干预组及复方鳖甲软肝片干预组大鼠肝组织匀浆 SOD活性明显升高(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.05);肝纤维化程度明显减轻(P<0.05),胶原表达减少;肝组织HGF、MMP-9 mRNA和蛋白表达明显升高,TIMP-2mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。  结论:蓝莓对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化有一定的干预作用,其机制可能与蓝莓提高机体抗氧化应激能力以及上调 HGF、MMP-9,下调 TIMP-2的表达有关。
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