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目的通过大鼠皮下注射及术中腹腔喷洒铜绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)观察对大鼠结肠部分切除术后吻合口愈合情况的影响并与5-Fu腹腔化疗作比较,进一步探讨其作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法健康SD大鼠64只,雌雄不限,体重230-270克,随机分为4组,每组16只,行结肠部分切除再吻合术。B和C组于术前3天起,隔日皮下注射PA注射液0.5 ml;C组术中局部喷洒PA注射液0.5 ml。A和D组于术前3天起,隔日皮下注射生理盐水0.5 ml;D组术中局部应用5-Fu (20 mg/kg)。术后观察各组大鼠的一般情况,死亡者明确其死因;各组大鼠于术后7d和14d,脱臼致死后开腹,确定吻合口位置,松解吻合口与周围组织的粘连,以吻合口为中心切取长约1cm的结肠,等分为两部分,一部分组织用3%戊二醛固定液预固定,1%锇酸固定液复固定,丙酮系列脱水,环氧树脂EP0N812包埋,半薄切片,光镜定位,Relehert超薄切片机切片,醋酸双氧铀及柠檬酸铅双重染色,JEM-120透射电镜观察粘膜下淋巴的形态及内皮细胞的超微结构。另一部分固定于10%中性多聚甲醛,常规石蜡包埋切片,分别行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,光镜下观察吻合口愈合情况、吻合口炎性细胞浸润,检测HPC、VEGF和PDGF-BB表达。所得数据采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。结果1、一般情况各组实验大鼠于术后6h基本恢复活动,12h恢复饮食。术后各组大鼠均无腹壁切口感染,术后各组均有死亡,及时对死亡只数进行补充。2、术后7天,用药组吻合口炎性细胞浸润、胶原沉积、HPC、VEGF和PDGF-BB表达均显著高于对照组组,5-FU对照组各项指标最低。3、吻合口组织透射电镜下观察显示,用药组大鼠吻合口组织的杯状黏膜上皮细胞及黏膜下的中性粒细胞、T细胞、巨噬细胞等淋巴细胞明显增多,核大,染色质密度大,染色较深,线粒体等细胞器增多;对应5-FU对照组粘膜上皮细胞及粘膜下的淋巴细胞较少,核小,染色较浅,线粒体等细胞器也较小。结论PA-MSHA能激活大鼠的免疫系统,提高巨噬细胞等免疫细胞活性。能促进细胞生长因子的分泌,在一定程度上可促进肠吻合口的早期愈合,其机制可能主要与PA-MSHA特异激活细胞表面Toll样受体有关。