固定化技术是现代生物工程领域中的一项新兴技术，应用范围涉及到生物学、有机化学、化学分析、医疗诊断、环境净化及能源生产等多个领域。固定化的方法、条件和载体材料决定了固定化酶或细胞的性能。能否较长时间保持固定化酶或细胞的强度和活性，并使其可重复使用，是固定化技术能否实际应用的关键。 本文选择聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)为主要载体材料，以前期研究中获得的可将石油烃类物质作为碳源的微生物菌株YY-12(假丝酵母)为固定化对象，以柴油为反应底物，研究了固定化微球的制备条件和运行条件对微球性能的影响，主要研究内容和结论如下： ①通过试验确定了海藻酸钠包埋法、PVA-H3BO3法和PVA-Na2SO4法制备固定化微球的最佳条件。 ②海藻酸钠包埋法制备的固定化微球对反应体系中柴油的去除率仅为81.7％，与游离微生物的去除效果81.3％相比没有显著升高，而PVA-H3BO3微球和PVA-Na2SO4微球对柴油的去除率均超过90％。 ③对PVA-H3BO3微球和PVA-Na2SO4微球的性能测定和扫描电镜观察结果表明，这两种固定化微球都具有良好的弹性和渗透性，较高的比表面积和孔容，其内部的孔隙结构有利于反应底物和营养物质的传递，以及微生物细胞在载体内部的附着生长。 ④PVA-H3BO3微球和PVA-Na2SO4微球对温度和pH值的适应性比游离微生物更强，最适温度为33℃，最适pH=7。 ⑤活化48h的固定化微球的运行效果最好，延长活化时间会导致微球破碎率的上升和运行效果的下降。 ⑥固定化微球和反应体系的体积比为1:10时，运行效果最好。加大接种量并不能体现出微生物细胞高初始浓度的优势，反而会导致去除率的下降。 ⑦用PVA-H3BO3微球和PVA-Na2SO4微球连续运行5次，对柴油的去除率分别可保持在70％和80％以上，破碎率分别在1％和8％以下，固定化微球的重复使用性和稳定性较好。