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近年来,随着促性腺激素释放激素（Gonadotropin-releasinghormone,GnRH）主动免疫去势研究的不断深入,其对动物免疫系统的影响也越来越引起人们的关注,但目前关于这方面的研究资料较少。脾脏是动物机体的重要外周免疫器官,其功能是否受GnRH主动免疫的影响?如何影响?此外,GnRH主动免疫后,机体对外来抗原刺激所产生的应答反应如何?这些都有待进一步了解探寻。本研究采用D型赖氨酸取代GnRH第6位的甘氨酸的GnRH并列体二聚物（G6k-GnRH-Tandem-Dimer,TDK）为免疫原,Specol为佐剂,以SD雌鼠为模型探究GnRH主动免疫对动物脾脏免疫功能以及对注射牛血清白蛋白（Bovinealbumin,BSA）后机体产生特异性免疫反应的影响。本研究结果可丰富该领域的研究内容,为推动GnRH主动免疫去势技术在畜牧生产实践中的大规模应用提供更坚实的理论依据。（1）将36只4-5周龄雌性SD大鼠,随机分为不做任何处理的完整对照组（C）、7周龄进行双侧卵巢摘除的手术去势组（SC）和9周龄腿部肌肉注射1mLGnRH抗原（含50μgGnRH-TDK）的GnRH免疫去势组（IM）,每组12只。8周后加免,剂量及方法同初免。分别在初免和加免后每天观察C和IM组雌鼠的阴道涂片,连续观察30天并记录雌鼠发情情况;初免当天记为0wpv（weekspostvaccination）,在0、4和8wpv采集尾部动脉血样,14wpv时处死所有试验鼠,分离并记录脾脏和卵巢的重量。用放射免疫分析法（RIA）检测血清雌二醇（E2）和睾酮（T）含量,ELISA检测血清抗GnRH抗体滴度和血清细胞因子含量。提取脾脏总RNA,利用荧光定量PCR检测ER-α、GnRH-R和细胞因子基因的mRNA表达水平,流式细胞仪检测脾脏免疫相关细胞数量及T淋巴细胞分群情况。GnRH主动免疫后,雌鼠血清抗GnRH抗体滴度升高,加免后抗体滴度迅速上升,试验结束时抗体滴度上升到10.66±0.37ng/mL。与C组相比,IM组血清E2和T含量均下降到检测线以下;IM组卵巢平均重量为C组卵巢平均重量的25.21%。初免后,与C组相比,IM组雌鼠发情前期和发情期的时间占比极显著降低（P＜0.01）,发情后期及发情间期的时间占比极显著增加（P＜0.1%）,平均发情周期天数极显著增加（P＜0.01）,发情周期个数极显著减少（P＜0.1%）,加免后IM组雌鼠无完整发情周期。与C组相比,IM和SC组雌鼠脾脏重量和指数显著减小（P＜0.05）,不影响雌鼠脾CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数量及NK细胞数量（P＞0.05）,但显著减少脾B淋巴细胞数量（P＜0.05）。与C组相比,GnRH主动免疫去势不影响血清IL-1β、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-6和IL-10含量,显著上调脾脏IL-4的mRNA表达水平（P＜0.05）,但对IL-1β、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-10的mRNA表达水平无影响（P＞0.05）。SC组雌鼠除血清IL-1β、TNF-α和IFN-γ含量显著升高及脾脏TNF-αmRNA表达水平显著高于C组外,其余指标均与IM组相似。（2）将36只4-5周龄雌性SD大鼠,随机分成6组,即完整对照（C）、完整对照+BSA组（C+BSA）、免疫去势组（IM）、免疫去势+BSA组（IM+BSA）、手术去势组（SC）和手术去势+BSA组（SC+BSA）,每组6只。SC和SC+BSA组于7周龄进行双侧卵巢摘除手术;IM和IM+BSA组于9周龄腿部肌肉注射1mLGnRH抗原（含50μgGnRH-TDK）,8周后加免,剂量及方法同初免,C和C+BSA组不做任何处理。分别在初免和加免后每天观察C、C+BSA、IM和IM+BSA组雌鼠的阴道涂片,连续观察30天并记录雌鼠发情情况。初免当天记为0wpv,在12wpv时C+BSA组,IM+BSA组和SC+BSA组雌鼠于腿部肌肉注射1mLBSA抗原（Specol为佐剂,含50μgBSA）,C、IM和SC组于雌鼠腿部肌肉注射1mL佐剂,每两周采集尾动脉血样,所有试验鼠于20wpv处死,分离并记录脾脏和卵巢重量,RIA法检测血清E2和T含量,ELISA法检测血清抗BSA抗体含量。与C和C+BSA组相比,IM和IM+BSA组雌鼠后血清E2和T含量均下降到检测线以下;IM和IM+BSA组雌鼠卵巢平均重量分别为C组和C+BSA组卵巢平均重量的27.17%和25.77%;初免后,与C和C+BSA组相比,IM和IM+BSA组雌鼠的发情前期和发情期的时间占比极显著减少（P＜0.01）,发情后期和发情间期的时间占比极显著增加（P＜0.1%）,平均发情周期天数极显著增加,平均发情周期个数极显著减少（P＜0.01）;加免后,IM和IM+BSA组雌鼠无完整发情周期;各组间脾脏重量和脾脏指数无显著差异（P＞0.05）。注射BSA疫苗后第二周（即14wpv）,C+BSA,IM+BSA和SC+BSA组均产生较高的抗BSA抗体,从14wpv直至试验结束,三个组抗BSA抗体含量无差异（P＞0.05）,并保持较高水平。综上所述:GnRH主动免疫雌性大鼠,能显著降低雌鼠血清E2和T含量,使雌鼠发情周期停滞,有效抑制雌鼠的生殖能力;GnRH主动免疫对雌鼠脾部分免疫细胞数量和细胞因子mRNA表达水平及血清中部分细胞因子含量产生一定影响,使机体Thl/Th2达到一个新的平衡,不影响机体应对外来抗原的特异性免疫应答。