校园潜伏结核感染的筛查

来源 :山东省医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suna_lili82
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目的: 用酶联免疫斑点实验(Enzyme-linked immunospot,ELISPOT)和结核菌素皮肤实验(Tuberculin Skin Test TST)两种不同的实验方法检测的大学生潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)率;比较2种实验检测结果,为将来是否可以以ELISPOT实验,或者两种实验相结合为基础进行大学生的LTBI的筛查和预防性治疗提供初步的理论依据;如果筛查中出现菌阳的结核病患者,则对获得的菌株进行基于结核分枝杆菌散在分布重复单位(Mycobacterial interpersed repetitive units,MIRU)的基因分型,拟从长期随访过程中获得多个菌株,从而从分子流行病学与传统流行病学相结合的角度分析大学生中结核病流行传播情况,以便更好的控制校园结核病的发生。 方法: 运用两种细胞免疫试验方法-ELISPOT和TST对大学生以及作为对照的校工群体进行LTBI者的筛查。对于胸部透视异常者,进行痰分枝杆菌的培养,对于获得的菌株进行MIRU基因分型。 结果: 1.学生群体中TST实验结果获得率为88.94%(796/895),ELISPOT确定结果获得率为94.75%(848/895);校工群体中TST实验结果获得率为91.36%(148/162);ELISPOT确定结果获得率为95.68%,在学生和校工2个群体中,ELISPOT实验结果的获得率均高TST试验,特别是在学生群体中更有显著性差异(P<0.01)。 2.学生群体中TST实验总的阳性率为21.80%(167/766),ELISPOT实验总的阳性率为13.84%(106/766);校工群体中TST实验总的阳性率为22.70%(32/141),ELISPOT实验总的阳性率为12.77%(18/141),无论是在学生还是校工群体,TST实验的阳性率均大于ELISPOT实验阳性率,且差异有统计学意义(P学生<0.01,P校工<0.05)。 3.2个群体中,通过卡方检验ELISPOT实验结果均不受BCG接种的影响(P>0.05),而TST实验结果显著受到BCG接种影响(P<0.05);2种实验的符合情况采用McNemar检验,学生群体中Kappa=0.123;校工群体中Kappa=-0.004,符合性较差。 4.学生群体的ELISPOT实验阳性结果中,对应的TST实验硬结直径的中位数是11.5mm,;ELISPOT实验阴性结果中,对应的TST实验硬结直径的中位数是8.75mm,2组硬结直径的比较有显著性差异(P<0.01);校工群体中2组硬结直径的比较没有显著性差异(P>0.05)。 5.学生群体中, BCG接种组的2种实验不相符的结果中,ELISPOT(-)/TST(+)人数所占的比例大于ELISPOT(+)/TST(-)人数的2倍,而在BCG未接种组,ELISPOT(+)/TST(-)人数所占的比例大于ELISPOT(-)/TST(+)结果的2倍,且均具有统计学意义。(PBCG接种<0.01;PBCG未接种<0.05),BCG接种与未接种组间TST实验硬结直径的比较也有显著性差异(P<0.01);在校工群体没有得到以上结果。 6.对于学生群体,在ELISPOT(+)、ELISPOT(+)/TST(+)和ELISPOT(+)/TST(-)3组结果中,CFP-10抗原孔产生的T细胞斑点数的中位数均为32/106PBMC,而ESAT-6抗原孔产生的T细胞斑点数的中位数分别为24/106PBMC、32/106PBMC和20/106PBMC,除了ELISPOT(+)/TST(+)组中两种抗原孔产生的斑点中位数相等外,其余两组CFP-10抗原孔产生的斑点数均多于ESAT-6抗原孔且差异均有统计学意义(P<0.05);ELISPOT(+)/TST(+)组中处于临界值的反应有6个,占16.22%,ELISPOT(+)/TST(-)处于临界值的反应有10个,占14.49%。106个ELISPOT阳性结果中,对CFP-10抗原反应的总的阳性率为90.57%,ESAT-6抗原总的阳性率为67.92%;2个率的比较有显著性差异(P<0.01);校工群体中,对于以上3种结果ESAT-6抗原孔产生的T细胞斑点数的中位数分别为24/106PBMC、30/106PBMC和24/106PBMC,CFP-10抗原孔产生的斑点中位数34/106PBMC、16/106PBMC和38/106PBMC,ELISPOT(+)/TST(+)组中处于临界值的反应有2个,占50%,ELISPOT(+)/TST(-)结果组中,没有处于临界值的反应,CFP-10抗原孔产生的斑点数多于ESAT-6抗原孔且差异有统计学意义(P<0.05),CFP-10抗原总的阳性率为72.22%; ESAT-6抗原总的阳性率为61.11%;2个率的比较没有显著性差异(P>0.05)。 7.筛查中5人胸部透视异常,后经进一步检查确诊4人为结核患者,1人为气胸。这4名结核患者包括1人为菌阳性肺结核,2人为菌阴性肺结核,另外1人为结核性胸膜炎。利用MIRU分型技术确定该菌株的基因型为“223325173533”。 结论: 通过利用ELISPOT和TST实验对大学生进行LTBI的筛查,初步掌握了用两种不同的细胞免疫方法获得的LTBI率,用MIRU技术对获得的1株菌株进行基因分型,为以后学校学生的随访、调查结核病的传播奠定了基础。ELISPOT实验不受BCG接种的影响,具有较好的特异性;TST实验受到BCG接种的显著影响,一方面导致2种实验较差的符合性,另一方面也说明了目前国内基于TST≥15mm的预防性治疗将会产生一定数量的过度治疗。ELISPOT实验如果能够降低成本,不失为一种较好的LTBI筛查的方法,只是鉴于它的动力学特点,处于临界值的结果最好连续监测,至于连续监测间隔的时间以及最适合我国人群的cutoff值还需要在以后的大量的临床和LTBI的研究中去确定;对于未进行BCG接种的学生,在排除了NTM感染后,从理论上讲,TST实验应该可以继续使用,但是cutoff值也需要在以后的大量研究中去确定。
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