【摘 要】
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PJS综合症是一种遗传性肿瘤综合症,该病患者患肿瘤的几率增加。致病基因编码的核定位激酶LKB1作为肿瘤抑制子在发挥作用,但是LKB1在细胞中调控的机制及生理基础都不清楚。研
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PJS综合症是一种遗传性肿瘤综合症,该病患者患肿瘤的几率增加。致病基因编码的核定位激酶LKB1作为肿瘤抑制子在发挥作用,但是LKB1在细胞中调控的机制及生理基础都不清楚。研究表明LKB1在细胞中被磷酸化并且Thr336磷酸化位点在LKB1抑制细胞生长中起到重要的作用。为了研究LKB1在不同细胞中的表达规律及其对细胞增殖的抑制功能,本实验通过生物信息学方法选取LKB1 Thr336位点附近10个氨基酸且使Thr336位点磷酸化,并铰链上BSA,以此为抗原,对兔子进行免疫,制备的抗血清通过Western blot检测抗体效价,并用LKB1抗体和p-LKB1(Thr336)抗体分别对人正常肝脏细胞HL7702、人胚肾细胞 HEK293、小鼠肉瘤细胞 S180、非洲绿猴肾细胞 COS7及人结肠癌细胞 Caco2检测。结果显示,LKB1抗体不仅识别 His-LKB1蛋白而且识别 p-LKB1(Thr336)肽段,而p-LKB1(Thr336)抗体仅识别p-LKB1(Thr336)抗原;且在正常细胞及肿瘤细胞中LKB1和p-LKB1(Thr336)表达量有差异,在增殖越快的细胞中，p-LKB1(Thr336)表达量越高。
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