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应用肿瘤疫苗激发荷瘤宿主产生抗肿瘤免疫反应以治疗肿瘤或接种高危人群预防肿瘤的主动性免疫治疗是目前肿瘤生物治疗有效的方法之一，也是肿瘤免疫界关注的热点。随着人们对肿瘤免疫的深入认识，瘤苗研究的发展极为迅速。利用现代分子生物技术已发现了多种肿瘤特异抗原（TSA）、肿瘤相关抗原（TAA），用这些特异多肽或对应基因制备多肽疫苗或基因疫苗却未能取得良好效果。原因可能是：肿瘤是多源性细胞克隆，潜在表达多种肿瘤抗原，体内识别某一或某几种抗原肽的特异性杀伤细胞无法识别全部肿瘤细胞，从而不能抵制整个肿瘤生长；与之相比，全细胞瘤苗可潜在表达多种肿瘤抗原，免疫原性强，制作简单，费用低廉，只要有任何一个MHC位点相匹配就可以成为通用瘤苗，因此，制备全细胞瘤苗仍然是一种很好的方法。 本研究室已发现，经多聚甲醛处理的艾氏腹水瘤细胞作为瘤苗免疫小鼠可抵抗致死量肿瘤细胞再次攻击，免疫鼠存活率显著提高，生存期延长，初步研究证明细胞免疫与体液免疫都参与此瘤苗诱导的机体抗肿瘤免疫应答，并成功研制出一株抗小鼠艾氏腹水瘤细胞的单克隆抗体1A3，初步明确了相关抗原的性质。在此基础上，本实验对此全细胞瘤苗免疫后机体产生保护性免疫反应的机理及1A3的体内抗肿瘤作用进行了进一步研究，为后期开展全细胞瘤苗临床前期的验证奠定基础。 第四军医大学硕士学位论文一1、thIlllffijFgr：JW81JImixdi！I％＃tJ’．，．mAn～～’．t． 4％的多聚甲醛处理后的艾氏腹水瘤细胞作为全细胞瘤苗兔疫小鼠，建立瘤苗动物模型，分别峨台盼蓝染色法、’＊释放法狈定瘤苗獭组、荷瘤组、正常组小鼠脾细胞对亲本艾氏腹水翩胞、印刀O细胞的杀伤滑牲。同样方法处理SbZ／U细胞作为对照瘤苗瓣小鼠，测铡鹏苗组小翩细胞对亲本艾氏腹水瘤细胞的刹矢后性。观察结果显示，在效靶比为200：1时，瘤苗免疫鼠脾细胞体外獭亲本艾氏腹水瘤细胞的滞率（％）为仰3土 3二）％，髓高于对照瘤苗组（0．5士2．刀％、荷瘤绷uJ士2．3）％、正常绷6．1土1．1仰（P响．05）；同一效革比时，瘤芭免疫瓣细胞对亲轮氏腹水瘤细胞的狐御显著高于对SP2／细胞的杀份孰8．8土 0．4）％（P＜0．05人由此可认为艾氏脸对硼奢全细胞瘤茵可8歇劲丈诱发机体产生特异注杀伤活性而参与撇？瘤保护性免疫正z苔。2、抗艾氏腹水瘤细胞单克隆抗体IA3的治疗效果 复苏液氮中冻存的IA3杂交瘤细胞进行克隆化培养，8龋后胜最好的阳L扩大培养并常规伟u备含单抗的腹水，利用离子交换层析法纯化抗体，鉴定单抗的纯度及活胜，纯化后抗体分另以0．imp、0．smp、imp、Zmgh的齐量，中瘤细胞攻击后－1天、0天、l天h）和4天、5天、6天旧）两种注射时间，给予小鼠脸鹅羽朗个抗鼠出血热病毒单克隆抗体3GI作为对照抗体，溯寸时间、剂量、途径对应同上；另设q瘤细胞攻击对照组。观察并iB？瘤细胞攻击后1个月内小鼠的生存期。结果显示，小鼠接受IA3抗4后，未B8jil＝M＝：－随后的肿瘤细胞攻击或使已生长的肿瘤消退，生存期未见明显延长，组鼠之间无显著性差异…劝．05人赫一溯J帅司及Sde下，抗艾氏腹水瘤细胞单克隆抗体IA3未ggn生免疫保护作用。