拟南芥高亲和性K+转运蛋白AtHAK5功能位点的鉴定

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muhaiyu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
AtHAK5是KUP/HAK/KT转运体家族中的重要成员之一,是拟南芥高亲和性钾离子转运体,其基因表达受低钾条件的强烈诱导,编码蛋白在低钾条件下可以整合到细胞质膜,体现为对低钾环境的适应。本研究旨在找到拟南芥高亲和性钾离子转运体AtHAK5的功能氨基酸位点。通过生物信息学的分析,我们发现在AtHAK5氨基酸序列中具有10处潜在的磷酸化位点,我们假设这些磷酸化位点对于AtHAK5的功能至关重要,从潜在的磷酸化位点中选择17个氨基酸进行定点突变。分别将AtHAK5 cDNA和带有17种不同点突变位点的AtHAK5转化到athak5突变体中,通过多代选择,获得14种稳定表达的T3代转基因植株。实验发现在50μM KCl,150μM CsCl的条件下athak5突变体具有根生长受抑制的特异表型。所以若我们将全长AtHAK5 cDNA转化到athak5突变体中将使突变体丧失它的特异表型,回复到野生型的表型。如果将对AtHAK5正常功能重要的氨基酸发生了突变,将含有这样突变的AtHAK5 cDNA转化到athak5突变体中将不能使突变体回复到野生型的表型。这样通过表型分析我们便可知道哪些氨基酸为AtHAK5的功能氨基酸,哪些为非功能氨基酸。最终确定T549A和T666A为非功能氨基酸位点,如下11个位点为AtHAK5功能位点:F85L、T86A、T311A、T359A、P551S、D552N、S603A、S604A、K668E、S698A和V713L。这为深入了解低钾信号在植物细胞内转导的分子机制以及对培育出可以高效吸收和利用钾肥的农作物新品种提供一个理论基础和科学依据。
其他文献
会议
“陈希同现象”值得研究□贾克非王宝森一死,陈希同的面目暴露出来了。王死前是北京市副市长、北京市委常委,还是北京市反腐败领导小组的副组长。那么正组长是谁呢?自非陈希同莫
会议
21世纪是海洋的世纪,海洋资源大都分布在从几十米到几千米的海底,探索和开采这些资源需要制造和使用大量仪器、设备和构筑物。在深海环境中,常采用安装方便,维护简单的牺牲阳极阴
会议
我国是焦化生产大国,每年约有2.85亿吨焦化废水外排,环境危害触目惊心。焦化废水的低成本高效治理是一个世界性的难题。目前,国内焦化厂废水需经三级处理才能达标。三级处理
阳离子聚合物在石油开采、造纸、采矿、纺织印染、日用化工及水处理等领域有着广泛的用途,二甲基二烯丙基氯化铵(简称DMDAAC)与丙烯酰胺(简称AM)的共聚物Poly(DMDAAC-co-AM)(