【摘 要】
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目的:探讨Nesfatin-1对肠易激综合征（IBS）内脏高敏感大鼠结肠动力及PAR2/m TOR信号通路可能发挥的调控作用,进一步深入探索Nesfatin-1在IBS内脏高敏感形成过程中调控作用,为寻找有效调控内脏高敏感的新切入点及发现IBS新的治疗策略提供依据。方法:1.实验动物及分组购买雄性2d龄Spragne-Dawley大鼠25只,其中PAR2-/-大鼠15只,PAR2+/+大鼠5只,体
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目的:探讨Nesfatin-1对肠易激综合征（IBS）内脏高敏感大鼠结肠动力及PAR2/m TOR信号通路可能发挥的调控作用,进一步深入探索Nesfatin-1在IBS内脏高敏感形成过程中调控作用,为寻找有效调控内脏高敏感的新切入点及发现IBS新的治疗策略提供依据。方法:1.实验动物及分组购买雄性2d龄Spragne-Dawley大鼠25只,其中PAR2-/-大鼠15只,PAR2+/+大鼠5只,体重为5～6g/只,新生乳鼠与母鼠共同饲养。将实验动物分为空白对照组（C组）和IBS模型组。造模成功后将模型组分为:PAR2+/+IBS组、PAR2-/-IBS组、PAR2-/-IBS中枢干预组、PAR2-/-IBS外周干预组,每组5只。2.制备内脏高敏感模型IBS组(PAR2+/+IBS组和PAR2-/-IBS组):新生乳鼠在第2～21天之间,每日上午与母鼠分离3个小时,在此期间停止哺乳,于第8～20天,每日下午给予0.5%醋酸0.4ml灌肠,第21天各组大鼠均断奶并与母鼠分离,在标准环境下单独饲养5周（8周龄）后开始实验。3.验证IBS动物模型C组、IBS组大鼠各5只,通过大鼠AWR评分进行内脏过敏性测定和结肠组织学染色验证模型。4.干预实验方法分别给予实验动物Nesfatin-1中枢途径和外周途径干预,中枢干预为侧脑室注射,外周干预为尾静脉注射。5.结肠动力检测利用机能实验系统记录实验大鼠结肠快波、慢波振幅和频率。6.利用免疫组化（IHC）检测各组大鼠结肠组织m TOR的表达情况。7.统计学分析采用统计软件SPSS 26.0和Empower Stats 3.0进行数据处理分析,符合正态分布的计量资料用均数±标准差（x±s）表示,两组间比较采用t检验,多组间两两比较采用单因素方差分析,P0.05）。2.IBS组大鼠AWR评分提示大鼠存在内脏高敏感,结肠组织学染色提示模型组大鼠肠黏膜无炎症等器质性病理改变存在,提示造模成功。3.不同分组IBS模型结肠动力比较3.1结肠快波指数比较:PAR2+/+IBS组、PAR2-/-IBS组、PAR2-/-IBS中枢干预组、PAR2-/-IBS外周干预组结肠快波振幅、频率的比较差异有显著性（F=53.855,F=9.794,P均<0.05）。3.2结肠慢波指数比较:PAR2+/+IBS组、PAR2-/-IBS组、PAR2-/-IBS中枢干预组、PAR2-/-IBS外周干预组结肠慢波振幅、频率的比较差异有显著性（F=135.580,F=20.731,P均<0.05）。4.结肠组织m TOR的表达:PAR2-/-IBS中枢干预组、PAR2-/-IBS外周干预组结肠组织m TOR的表达均高于PAR2+/+IBS组（P<0.05）;PAR2+/+IBS组m TOR表达高于PAR2-/-IBS组（P<0.05）。结论:1.Nesfatin-1参与IBS内脏高敏感大鼠结肠动力的调控,中枢干预途径的调控作用较外周途径显著。2.Nesfatin-1参与调控内脏高敏感大鼠结肠动力的机制可能是通过PAR2/m TOR信号通路双向调控实现的。
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