在全球教育信息化的背景下,党的十九大开启了加快教育现代化、建设教育强国的新征程。信息技术的发展为生物教师创新教学模式、转变教与学的方式、提升专业发展水平提供了可能,但同时也对教师提出了更高的专业要求。整合技术的学科教学知识(TPACK)是教师运用信息技术融合学科性教学所必备的一种新兴的知识。教师的专业素质主要通过教师的课堂教学行为体现出来。因此,对生物教师课堂教学行为的研究与反思有助于评价和提升教师自身的教学能力,提高课堂的教学效率。基于以上提出的研究背景,本研究选取了优秀生物学科教师的课堂教学视频,采用定量与定性研究相结合的方式,探究高中在职生物教师的课堂行为,深度分析教师在课堂中的行为序列模式与TPACK水平,提出针对一线高中生物教师的相关建议。研究结果表明:(1)教师的提问贯穿课堂始终,连接了教学环节,引导教学内容层层递进,具有频繁且简短的特点。(2)教师的反馈方式包括再次提问、表扬、鼓励、指导或共同促进,用语准确丰富,具有针对性且及时。这些教学行为反映了教师的TPACK水平,高水平的TPACK能够帮助教师提高课堂的效率。(3)持续时间和频度都占有很大比例的教师行为是教师讲解。除此之外,四名生物教师在课堂中也使用了演示法、实验法和讨论法。(4)教师给予指导或指令是维持课堂的必要教学手段。这一课堂教学行为主要运用了教师的PK、PCK和TPACK知识,提升其水平有利于实现学生的主体地位和教师的主导作用。