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近年来PPRV跨地区、跨国界的传播,对全球防控PPR提出了严峻挑战。开展PPRV细胞受体的研究有助于探究PPRV的致病机理,对于该病的防控具有指导意义。与PPRV同属的人的病毒麻疹病毒受体的相关研究已经很深入,从文献了解到人的麻疹病毒的受体分别为CD46、Slam、Nectin4这三种。目前,已经证实PPRV与MV一样利用SLAM作为受体开启病毒的入侵,本论文旨在阐明CD46分子是否也做为PPRV的受体,开展了如下工作：1.采用3’/5’RACE方法从绵羊外周血淋巴细胞中首次克隆该基因,测序结果显示绵羊CD46含有七种不同的可变剪切形式。构建重组表达载体pCMV-Myc/CD46并在CHO-K1细胞中高效表达,经、Vestern blotting分析CD46蛋白表达良好,片段大小与预期符合。2.取编号CD46a基因进行常规生物信息学分析。结果表明,绵羊CD46a的cDNA序列开放阅读框长1083bp,编码由360个氨基酸残基组成的多肽,该多肽分子质量理论值为39ku,理论等电点为6.5。对该蛋白结构分析发现绵羊CD46a第1-42位氨基酸残基为信号肽序列共有5处N糖基化位点,4处蛋白激酶C磷酸化位点,5处Ⅱ-酪蛋白激酶磷酸化位点,7处N-豆蔻酰化位点。二级结构中无α螺旋,β折叠占26.1%,其余73.9%为转角,该蛋白具有四个结构域,与人源CD46的同源性较高。同时对绵羊CD46a-g进行了氨基酸序列比较分析,发现绝大部分的序列差异位于跨膜区和膜内区。3.构建了PPRV野毒株(Hw)和疫苗株(Hv)真核表达载体pCMV/HA/Hw和pCMV/HA/Hv,经免疫荧光、Western检测,证实构建的重组质粒能够在CHO-K1细胞质中高效表达。4.利用同源模建的方法,预测了绵羊CD46a以及PPRV野毒株及疫苗株H蛋白的结构;并利用分子对接的方法,分别预测了CD46a与PPRV野毒株／疫苗株H蛋白之间的相互作用关系,并进一步分析了绵羊CD46a-g蛋白不同剪切体与PPRV野毒株及疫苗株H蛋白之间的相互作用关系。计算结果显示,绵羊CD46a-g蛋白均可以与PPIV野毒株H蛋白发生较强的相互作用,而与PPRV疫苗株H蛋白发生较弱的相互作用。5.通过复合物同源模建以及相互作用能计算,分析了CD46a-g蛋白不同剪切体与PPRV野毒株以及疫苗株H蛋白之间的相互作用关系,计算结果显示：CD46a-g蛋白的不同剪切体,均可以与PPRV的野毒株及疫苗株H蛋白发生相互作用,但是相互作用能力有一定的差别。分别对绵羊CD46a-PPRV Hw和绵羊CD46a-PPRVHv两个复合物分别进行丙氨酸扫描结果如下： a.在PPRV野毒株H蛋白丙氨酸扫描结果中,Tyr543、Ms481、Tyr541、Leu464和Leu483这五个突变对与绵羊CD46a蛋白相互作用的影响最大；b.在PPRV疫苗株H蛋白丙氨酸扫描结果中,Tyr543、 His481、Tyr541、Leu464和Phe448对与绵羊CD46a蛋白相互作用的影响最大；c.在绵羊CD46a丙氨酸扫描之后对与PPRV疫苗株H蛋白相互作用影响最大的是：Lys120、Lys122、Asn126、Leu123以及Gln94; d.在绵羊CD46a丙氨酸扫描之后对与PPRV疫苗株H蛋白相互作用影响最大的是：Lys122、Gln94、Pro98、Leu123以及Va196。