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多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam)又名意大利黑麦草，为一年生或二年生草本植物。多花黑麦草营养物质丰富，品质优良适口性好，各种家畜均喜采食。该草种生长快，分蘖力强，再生性好，产量高，是一种优良的饲料用草。除了应用于畜牧业，多花黑麦草还是城市绿化的常用草种。 多花黑麦草斑驳病毒(Ryegrass mottle virus，RGMoV)是多花黑麦草的重要病原，能引起多花黑麦草的斑驳和花叶，严重影响牧草的产量和品质。该病毒在我国至今还未见报道，为了防止该病毒通过引种传入我国，开发出准确有效的检测该病毒的方法是很有必要的。由于血清学方法具有灵敏、快速、适合大量样品检测等特点，因此在植物病毒检测中被广泛应用。由于很多植物病毒较难提纯，于是人们尝试利用基因工程的方法获得病毒的外被蛋白，然后利用重组外被蛋白制备抗血清，并将所得的抗血清用于病毒的检测。 根据已报道的多花黑麦草斑驳病毒(RGMoV)外被蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物，以病毒基因组为模板，用RT-PCR的方法获得病毒的外被蛋白基因，然后将其克隆至表达载体pGEX-4T-1中，在大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE电泳显示：经IPTG诱导，宿主大肠杆菌BL21(DE3)plys表达出了预期分子量大小(52kD)的目的蛋白。蛋白质印迹实验进一步证实：目的蛋白得到了正确表达，并且表达产物以不溶性包涵体的形式存在。用包涵体洗涤缓冲液(含2％的DOC)洗涤初提纯的包涵体，去除黏附在包涵体的可溶性蛋白。用6M的盐酸胍溶解洗涤后的包涵体沉淀，然后重折叠目的蛋白使其恢复天然构象。 本论文利用原核表达系统成功地表达出了多花黑麦草斑驳病毒外被蛋白，并对目的蛋白进行了初步纯化，为利用重组蛋白制备抗血清打下了基础。