基于金磁—量子点双标记的牛乳酪蛋白快速免疫检测新方法研究

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jack_123456
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,随着人们的生活水平日渐提高以及牛乳制品的广泛普及,牛乳过敏问题得到了人们的广泛关注。本论文将量子点良好的光学特性与金磁微粒可被快速富集的优势相结合,建立了基于金磁-量子点双标记的牛乳酪蛋白快速免疫检测的新方法,主要开展了以下几个方面的工作:一、以巯基乙酸为稳定剂,采用水相合成法成功制备了表面带有羧基的绿、黄、橙、红四种荧光颜色的Cd Te量子点;采用一锅法合成了氨基化的磁性复合微粒(Fe3O4-PEI),通过两次包金过程,得到了多层复合型金磁纳米微粒(Fe3O4-PEI-Au1-PEI-Au2)。并对其相关性能进行了表征与测试,实验结果表明,所制备的量子点具有良好的光学性能,其激发光谱宽且连续,发射光谱窄而对称,荧光强度较高、且不易聚沉;所制备的金磁微粒粒径均一,具有良好的分散性和晶体结构且磁性好,能很好的用于磁性分离和生物修饰,为本论文后续的拓展与应用研究提供了保证。二、以橙色CdTe量子点为代表,小鼠IgG作为模式抗原,兔抗鼠IgG和羊抗鼠Ig G均作为模式抗体,可与小鼠Ig G上的不同位点相结合。其中,羊抗鼠Ig G偶联Cd Te量子点得到荧光探针,兔抗鼠Ig G偶联金磁微粒得到金磁探针,在此基础上构建了金磁-量子点双标记快速免疫检测体并优化了两探针的合成条件。金磁探针与小鼠Ig G相结合,并结合量子点荧光探针上的兔抗鼠Ig G,最终形成“三明治”式的复合物。根据复合物上荧光强度的大小,从而实现对小鼠Ig G的定量检测。实验结果表明,在优化的探针条件下,小鼠Ig G的量与荧光检测信号呈正相关。由此说明基于金磁-量子点双标记免疫检测体系成立,有望用于实际样品检测中。三、在之前研究的基础上,采用两种可与牛乳酪蛋白不同作用位点结合的抗体,将其中单克隆抗体修饰到金磁微粒上作为捕获探针,多克隆抗体修饰到量子点上作为荧光检测探针,建立了一种基于“三明治夹心式”的牛乳酪蛋白免疫检测新方法,并用于牛乳过敏原的实际检测。结果得到酪蛋白含量在6.25~100ng/m L范围内与荧光强度具有良好的线性关系,最低检出限为1.8 ng/m L。通过和ELISA方法的对比以及加标回收实验证明本检测方法准确性好,稳定性强,重复性佳,可以用于实际样品的检测。该金磁-量子点双标记免疫检测体系可以为牛乳过敏原的检测提供理论和现实依据。
其他文献
农民增收是农业产业化发展的初衷和落脚点,农民专业合作社是农业产业化背景下,农民利益的代表者和实现农民收益的重要载体。本文受产业微笑曲线理论的启发,从产业链的视角,分
<正>商业行贿犯罪所涉及的罪名是刑法第一百六十四条规定的对公司、企业人员行贿罪,第三百八十九条第一款规定的行贿罪,第三百九十一条规定的对单位行贿罪,以及第三百九十三
随着无线通信技术的快速发展,射频微波频段的频谱资源日趋紧张,为了有效地利用有限的频率资源,对微波电路的性能要求越来越高。在射频收发、频率合成以及混频放大等射频电路
二苯基二氯硅烷(SiPh2Cl2)主要由氯苯和硅粉在催化剂的条件下反应或者由苯基氯化镁与四氯化硅反应生成,能与活泼金属(钠,锂,镁)发生反应,生成苯基环硅烷,除此之外,它还容易发生歧
<正>危机传导链:网络泡沫的报复?这场金融危机的远期原因是前苏联模式失败后,金融自由化和金融创新的加快,同时伴随着管制的放松,监管相对滞后;近因是,"9·11事件"后,美国提
法律本身是以不变的规则应对万变的社会事实,并企图用这样的规则之治逐步接近法治的理想。但一方面法律毕竟是落后于社会的发展,另一方面,法律用有限的文本难以规制多样的现
随着中国经济的迅速发展,能源在经济发展中的作用日益显著,特别是自中国成为原油净进口国以来,保持稳定的石油来源就显得更为重要。沙特阿拉伯的石油储量丰富,石油的产量和出
电脑横机是一种集计算机技术、自动化技术及针织工艺技术于一体的机电一体化的针织机械,适用于棉、麻、毛、羊绒及各种纱线的编织,具有高速、高效、高性能等优点。与国外横机
自1993年公务员公开考试以来,每年报考人数呈直线上升趋势。在公务员考试报考人员中,大学生组成了主力军。“公务员作为大学生职业选择之一,为何一直备受推崇?”这一问题值得
山东省SY集团总公司成立于1992年底,目前已初步形成以满足居民生活需求为目标的战略型投资控股集团。LS置业股份有限公司(以下简称LS置业)是山东省SY集团总公司控股的一家上