单纯性疱疹病毒(Herpes simplex virus，HSV)，属于疱疹病毒科，α-疱疹病毒亚科，是一类广泛存在于人群中的常见病毒。由于HSV具有易感染，易潜伏，易传染等特点，目前已造成全球2/3的人群感染HSV，因此加深对HSV感染机制的了解，从而研发特效药物已经迫在眉睫。本实验室在前期研究中筛选获得一株针对HSV-2膜蛋白gD（受体结合蛋白）的单克隆抗体m27f,发现它可以有效地中和HSV在细胞水平和小动物水平感染，具有潜在的临床应用价值。同时对m27f识别表位进行分析，发现m27f识别gD胞外区C端的pro-fusion区域中一段连续的线性表位，是一种新的中和抗体，因此对m27f的病毒中和活性的作用机制的深入研究与解析，将丰富对于单克隆抗体中和病毒机制的认识，为HSV治疗药物和预防疫苗的研制和开发提供重要的理论参考。本论文将从以下五章分别进行论述。　　第一章:文献综述。简要介绍了单纯性疱疹病毒的生物学特性、感染特性及体内的入侵与传播方式。重点介绍了参与HSV入侵过程的四个病毒膜蛋白及细胞受体的结构与功能。另外对膜蛋白gD的中和抗体研究进展及抗体工程也做了简单介绍。　　第二章:针对HSV-2膜蛋白gD的单克隆抗体m27f中和活性评估。对m27f的抗HSV特性进行检测，发现m27f能够抑制HSV感染导致的噬斑形成、能够抑制HSV的cell-to-cell的传播方式、能够抑制由HSV感染及瞬时表达HSV入侵复合体导致的合胞体的形成现象，综上显示m27f具有良好的中和活性。　　第三章:针对HSV-2膜蛋白gD的单克隆抗体m27f中和分子机制的研究。通过病毒吸附前后中和实验及抗体竞争性实验证实，m27f并不阻断gD与受体的相互作用，即揭示m27f作用在gD与受体结合之后的过程;随后通过BiFC系统实验发现m27f影响gD与下游融合复合物gH/gL的相互作用，揭示m27f可能通过影响gD与下游复合物的相互作用行使中和功能。　　第四章:嵌合抗体改造与评估:通过生化实验证实，经鼠源单克隆抗体m27f改造后的嵌合抗体c27f可以在细胞内正确组装、表达，且可以特异性识别gD蛋白，保留有抗原识别活性。同时噬斑中和实验显示c27f具有良好的中和活性，其活性略低于亲本鼠源抗体，具有潜在的临床应用价值。　　第五章:总结与展望。对新筛单克隆抗体m27f的抗病毒活性及中和作用机制进行总结，并对嵌合抗体c27f的应用前景进行了讨论。