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目的:观察辛伐他汀对人外周血内皮祖细胞(endothelialprogenitor cell,EPC)的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7天后,收集贴壁细胞,加入不同浓度辛伐他汀(分别为0.0001、0.001、0.01、0.1、1.0μmol/L)培养24小时。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-LIEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC,并在倒置荧光显微镜下计数。分别采用MIT比色法测定EPC的增殖能力、改良的Boyden小室测定EPC的迁移能力、黏附实验测定EPC的黏附能力、SA-β-Gal和DAPI双染测定衰老的EPC、流式细胞仪检测凋亡细胞。结果:辛伐他汀显著增加外周血EPC数量(P＜0.01),明显改善外周血EPC的增殖能力、迁移能力和黏附能力(P＜0.01或P＜0.05),0.01μmol/L辛伐他汀为最大增加EPC数量、促增殖、促迁移、促黏附效应。当加入P13K阻断剂Ly294002后,辛伐他汀改善EPC功能的上述作用被逆转。结果还显示,1.0μmol/L浓度辛伐他汀具有抗EPC衰老的作用(P＜0.01)。此外,在低浓度胎牛血清培养诱导的EPC凋亡实验中,辛伐他汀具有抗EPC凋亡的趋势。结论:辛伐他汀能够增加EPC的数量,改善EPC的增殖能力、迁移能力、黏附能力和抗衰老的作用。辛伐他汀促进EPC增殖、迁移、黏附作用涉及PI3K/Akt途径。目的:观察辛伐他汀联合内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)移植对裸鼠(nude mice)缺血后肢血管新生的影响,并探讨其机理。方法:雌性裸鼠分为4组,每组10只。对照组:生理盐水喂饲+磷酸缓冲液(PBS)肌肉注射;辛伐他汀组:辛伐他汀喂饲+PBS肌肉注射;EPC组:生理盐水喂饲+EPC移植;联合治疗组:辛伐他汀喂饲+EPC移植。外周静脉血分离、培养获得EPC,血样取自健康成年男性志愿者。结扎裸鼠右侧后肢膝关节以上股动脉,包括表浅和深部的分支。后肢缺血模型制作成功后,在EPC组、联合治疗组立即将5×10~6EPC分5点注射到右下肢的缺血周边区域。辛伐他汀组、联合治疗组裸鼠喂饲辛伐他汀(20mg/kg/只),每日一次,共21天。结果:在术后第10天,激光多普勒血流灌注图像指数(LDPI index)和对照组(0.46±0.05)比较,辛伐他汀组、EPC组、联合治疗组显著升高(0.59±0.06,0.68±0.07,0.81±0.07,P＜0.05或P＜0.01);在第21天,和对照组(0.57±0.06)比较,辛伐他汀组、EPC组、联合治疗组的LDPIindex显示进一步的改善(0.74±0.07,0.80±0.07,0.91±0.06,P＜0.05或P＜0.01),在4组中,联合治疗组LDPI index最高。毛细血管数目/肌纤维的比值在联合治疗组最高,其后依次为EPC组、辛伐他汀组和对照组(0.69±0.07,0.49±0.05,0.45±0.04 versus 0.26±0.03,P＜0.01)。TUNEL阳性细胞的比率,辛伐他汀组(25.62±2.62%)、EPC组(23.43±2.55%)、联合治疗组(14.43±1.42%)明显低于对照组(37.24±3.83%,P＜0.01),联合治疗组的TUNEL阳性细胞的比率在4组中最低。和对照组比较,辛伐他汀组、EPC组、联合治疗组的Bax阳性细胞的比率显著降低(39.03±4.27%,35.51±3.60%,20.84±2.05%versus 65.14±6.47%,P＜0.01);辛伐他汀组、EPC组、联合治疗组的Bcl-2阳性细胞的比率与对照组比较显著升高(34.70±3.52%,37.24±3.74%,68.16±6.25%versus 17.29±1.81%,P＜0.01);在4组中,联合治疗组的Bax阳性细胞的比率最低,Bcl-2阳性细胞的比率最高。和对照组比较,治疗组磷酸化Akt和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt的比值显著增加;在4组中,联合治疗组的p-Akt/Akt的比值最高。结论:辛伐他汀或内皮祖细胞移植单独应用均可促进血管新生;辛伐他汀联合内皮祖细胞移植则更显著地促进缺血后肢血管新生。辛伐他汀与内皮祖细胞移植的联合治疗不仅部分通过下调Bax和上调Bcl-2抑制缺血骨骼肌细胞的凋亡,而且显著活化Akt磷酸化。联合治疗的这些影响可能来源于辛伐他汀介导的血管新生、移植的EPC介导的血管新生,同时也来源于辛伐他汀改善移植EPC功能的有益作用。