水稻内生真菌与其化感作用相关性的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:shliukan
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本研究以强化感水稻PI312777和弱化感水稻Lemont为材料,田间种植并进行干旱胁迫处理,同时以湿地种植的材料为对照。对其内生真菌进行平板分离培养、菌种鉴定、发酵培养,并对其发酵液进行化感效应分析;结合T-RFLP技术对水稻内生真菌的群落多样性进行研究。具体结果如下:1、以平板培养法从供试样品中共分离出103株内生真菌,经鉴定主要为子囊菌亚门和半知菌亚门真菌。从四种供试样品中分离所得内生真菌数量呈规律性变化:干旱胁迫PI312777得到38株,湿地PI312777得到26株,干旱胁迫Lemont得到22株,湿地Lemont得到17株。在此两种处理条件下,强、弱化感水稻的内生真菌均以镰刀菌属为优势菌群;强化感水稻PI312777中黄孢原毛平革菌(具有降解酚酸类物质的功能)和麦角菌(具有产生生物碱物质的功能)的分离频率高于弱化感水稻Lemont,且在干旱胁迫下,上述两类真菌的分离频率均显著高于湿地种植的同种水稻。此外,强化感水稻PI312777中还分离到特有真菌毛壳霉(具有产生生物碱物质的功能)。2、内生真菌发酵液的生物测试结果显示:85%以上内生真菌的发酵液对稗草生长表现为不同程度的化感抑制,而并不影响其宿主水稻的生长;对稗草抑制率在50%以上的内生真菌分别来自于镰刀菌属、木霉属、弯胞霉属、麦角属和毛壳霉属;弯胞霉属、毛壳霉属真菌为强化感水稻PI312777所特有;麦角属真菌的化感抑草效率最高,对稗草根、茎的抑制率分别为92.36%和75.38%;麦角属真菌在强化感水稻中的分离频率高于弱化感水稻,且此真菌在干旱胁迫处理下的分离频率高于对照。3、利用限制性内切酶HaeⅢ和HinfⅠ,分别对扩增所得内生真菌ITS区间酶切,经毛细管电泳分析结果表明:四种供试样品内生真菌群落结构之间均存在显著差异。HaeⅢ酶切得到T-RFs分别是:干旱胁迫PI312777为28个, Lemont为17个,其对照株分别为19和16个;HinfⅠ酶切得到T-RFs分别是:干旱胁迫PI312777为29个,Lemont为26个,其对照株分别为24和13个;经Dickie真菌数据库序列长度比对,22种内生真菌主要属于担子菌亚门。T-RFs的生物信息学分析结果表明,强化感水稻PI312777中可降解酚酸类物质的腐生真菌数量高于弱化感水稻Lemont,同时干旱胁迫处理也会诱导该类内生真菌数量的增多;光硬皮马勃(含麦角甾醇)、丝膜菌属(可产生奥莱毒素)、鹅膏菌(可产生鹅膏菌毒素)均为强化感水稻PI312777所特有。综上所述,内生真菌与其宿主是一个相互影响、协同进化的统一体,不同化感潜力的宿主水稻通过其自身特性影响内生真菌的生长,在其体内形成特定的内生真菌群落结构;同时内生真菌可以影响宿主的化感特性,通过其代谢产物直接抑制水稻伴生杂草的生长从而增强宿主水稻的化感作用。
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