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目的:本研究应用链脲佐菌素(STZ)左下腹注射制备糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠模型,给予中药补中益气汤及枸橼酸莫沙必利对该模型进行干预治疗,利用Westernblot法对胃窦SCF蛋白表达进行测定,放射免疫法检测血浆SP水平,通过观察大鼠的一般情况、胃排空率等,研究探讨补中益气汤对糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空率、胃窦SCF蛋白表达、血浆SP水平的影响,探讨补中益气汤对DGP大鼠胃肠的作用及其可能机制,并为中医药临床治疗DGP提供实验依据。方法:雄性wistar大鼠40只,清洁级,重量(200±20)g/只,购自河北医科大学动物中心。将实验大鼠购回先适应性饲养1W,观察大鼠的一般情况,均正常者用于实验。取30只禁食12h,将链脲佐菌素左下腹注射STZ55.0mg/kg(用0.1M,PH=4.2的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲溶液配制成10mg/mL的溶液),观察造模组出现多饮、多食、多尿后,检测空腹血糖在16.7mmol/mL以上者为糖尿病模型制备成功,用高能量食料单日上午喂食,双日下午喂食,打乱大鼠进食规律,喂养4周,随机抽取2只大鼠和正常大鼠1只,处死,测胃内残留率较正常大鼠升高,造成胃轻瘫模型,在造模过程中大鼠死亡1只。将造模成功后大鼠随机分成补中益气汤组、西药组、模型对照组3组,各9只,另外9只未造模大鼠为非糖尿病正常空白组,总共为4组。每天记录3组大鼠的饮水量、食量、尿量、活动情况及大便变化,并每周于大鼠尾静脉测血糖和称体重一次。各组均在造模后1W同时开始灌胃给药,其给药剂量为:正常组及模型对照组,生理盐水15mL/kg;补中益气汤组15mL/kg,西药组枸橼酸莫沙必利5mg/kg,分别给大鼠灌胃,每天1次,灌胃共7W。治疗满7W后,各组给予半固体糊(羧甲基纤维素2.6g,淀粉2g,奶粉4 g,蒸馏水62.5 m L配成),比重为1.1 g·mL-1。按照3 mL·kg-1体重ig。于30 min后将大鼠断头处死,然后于断头处采5mL血,检测SP水平,迅速打开大鼠腹腔,并结扎贲门及幽门,取下整胃,用滤纸轻轻拭干之后,称量其胃全重。然后沿着大弯切开胃,并以蒸馏水反复冲洗胃的内容物,用滤纸拭干后称量胃净重。按公式计算胃排空率:胃排空率=[1-(胃全重-胃净重)/所给的糊重]×100%。取胃窦部组织(约100mg),提取蛋白质,用westernblot方法测定scf的蛋白质表达水平。结果:1实验大鼠一般状况:正常组的大鼠精神状态良好,活动自如,进食量、饮水量及尿量均无明显改变,大鼠体重逐渐增加;模型组大鼠造模后一直持续出现多饮、多食及多尿,体重逐渐减轻,皮毛毛躁干枯泛黄;中药组和西药组大鼠均较模型组的一般情况有一定的改善。在实验中,由于造模过程不当,模型组大鼠有一只死亡;2大鼠体重变化:与正常组大鼠相比较,模型组、中药组及西药组大鼠的体重均有明显减轻,其差异均有统计学意义(p<0.05);中药组和西药组大鼠的体重与模型组相比有所增加,其差异均有统计学意义(p<0.05);中药组体重较西药组有所增加,其差异有统计学意义(p<0.05);3大鼠血糖变化:模型组、中药组及西药组的大鼠血糖均较正常组明显升高,差异具有统计学意义(p<0.05);中药组大鼠的血糖水平与模型组大鼠相比,血糖降低,差异具有统计学意义(p<0.05);西药组和模型组大鼠血糖相比较,血糖降低,其差异无统计学意义(p>0.05);中药组和西药组血糖相比,差异具有统计学意义(p<0.05);4大鼠的胃窦平滑肌组织应用苏木素-伊红(he)染色显示:正常组大鼠胃窦粘膜组织结构完整,血管丰富,腺体排列整齐;中药组、西药组胃窦粘膜尚完整,血管较丰富,腺体排列比较整齐;模型组大鼠胃窦粘膜不完整,血管数量明显减少,腺体排列紊乱;5大鼠胃排空率与正常组相比,模型组、中药组、西药组大鼠的胃排空率下降,差异具有统计学意义(p<0.05);中药组、西药组大鼠胃排空率较模型组相比均明显增加,差异有统计学意义(p<0.05);中药组和西药组胃排空率比较,胃排空率高,差异有统计学意义(p<0.05);6大鼠血浆sp水平变化:模型组、中药组、西药组大鼠的血浆sp水平低于正常组,差异具有统计学意义(p<0.05);中药组和模型组比较大鼠血浆sp减少,差异有统计学意义(p<0.05);西药组和模型组比较大鼠血浆sp减少,差异有统计学意义(p<0.05);中药组和西药组比较升高血浆sp水平效果无统计学意义(p>0.05);7大鼠胃窦scf蛋白表达:模型组、中药组、西药组大鼠胃窦scf蛋白表达低于正常组,差异有统计学意义(p<0.05);中药组和模型组比较大鼠SCF蛋白表达减少差异有统计学意义(P<0.05);西药组和模型组比较大鼠SCF蛋白表达减少差异有统计学意义(P<0.05);中药组和西药组比较升高SCF蛋白表达效果有统计学意义(P<0.05)。结论:1.糖尿病胃轻瘫大鼠存在胃肠运动障碍,补中益气汤能够降低DGP大鼠血糖水平,提高大鼠胃排空率,可能为其治疗DGP的作用机制之一。2.补中益气汤促进大鼠的胃排空治疗DGP大鼠,可能通过提高大鼠血浆SP水平,增加胃肠道蠕动,进而促进胃排空。3.补中益气汤可以通过提高大鼠胃窦SCF蛋白表达,增强SCF/KIT信号传导,加快胃肠蠕动,促进胃排空治疗DGP,为中医药治疗DGP提供了实验依据。