玫烟色棒束孢对植物黄酮甲基糖基化转化的研究

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植物黄酮是一类结构和活性复杂多样的重要次级代谢产物,在医药、农业和食品加工领域具有广泛的用途,但低溶解性和低生物利用度等特性限制了黄酮功能的发挥。微生物转化可在温和条件下将黄酮类化合物转化为黄酮苷,提高水溶性和生物利用度。玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)等丝状真菌可以利用细胞内的葡萄糖基转移酶和氧甲基转移酶催化有机化合物产生具有不同生理特性和生物活性的糖苷衍生物。本研究通过微生物转化,从四种丝状真菌中筛选到一株高效转化不同黄酮化合物的玫烟色棒束孢菌株,得到了一系列结构新颖的糖苷衍生物,并初步探索了这些化合物的降脂和抗炎活性,具体进展如下:1.通过玫烟色棒束孢(I.fumosorosea)ACCC 37814、罗伯茨绿僵菌(Metarhizium robertsii)ARSEF 23、麦角菌(Clavieps purpurea)ACCC 37002、蛹虫草(Cordyceps militaris)ACCC 50985四种丝状真菌的微生物转化实验,发现玫烟色棒束孢ACCC 37814能够高效转化10种黄酮类化合物(1-10),其中对柚皮素1、木犀草素2、香叶木素3和刺芒柄花素4四种的转化效率较高。2.利用玫烟色棒束孢ACCC 37814转化1-4号化合物,分离纯化得到了1a(2.3 mg)、1b(3.2mg)、1c(6.5 mg)、1d(1.5 mg)、2a(2.3 mg)、2b(2.8 mg)、3a(2.0 mg)和4a(4.0 mg)糖苷衍生物,然后用NMR技术解析了各糖苷衍生物的结构,其中六个为新型甲基吡喃葡萄糖苷(1b,1d,2a,2b,3a,4a),两个为已知甲基吡喃葡萄糖苷(1a)和吡喃葡萄糖苷(1c)。3.使用四种黄酮(1-4)和八种糖苷衍生物(1a-1d,2a,2b,3a,4a)进行了3T3-L1前体脂肪细胞的降脂实验和RAW 264.7巨噬细胞的抗炎实验,发现在毒性允许范围内,试验浓度为100μg/mL时,化合物1b和化合物3a能够显著抑制3T3-L1前体脂肪细胞增殖和显著降低细胞分化过程中产生的脂质小滴数量(P<0.05),化合物1b能够显著降低NO释放量,抗炎效果最强,高达97%(P<0.05)。本研究通过微生物转化,筛选到了能够高效甲基糖基化植物黄酮的真菌玫烟色棒束孢ACCC37814。利用该菌对四种黄酮类化合物的转化,获得了一系列结构新颖且具有较好降脂、抗炎作用的糖苷衍生物,拓展了该类化合物的结构空间,为活性化合物的筛选提供了资源。本论文的研究结果有助于挖掘高效菌种资源,拓展黄酮类化合物的结构空间和生物学功能,为杂粮作物品质育种和药物筛选提供了选择。
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