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目的:姜黄素是从天然植物姜黄根茎中提取的一种多酚,具有抗氧化、消炎、抗肿瘤、预防老年性痴呆、治疗风湿等多种功效。本论文旨在研究姜黄素对体外培养的人结肠癌细胞株HT-29、SW480细胞中β-catenin及VEGF表达的影响,从而探讨姜黄素抑制细胞生长、增殖的分子机制。为临床结肠癌的治疗提供理论和实验依据。
方法:1.利用实时定量PCR(Real-time PCR)检测药物处理后HT-29、SW480细胞中β-catenin和VEGF的mRNA表达变化:每种细胞传6瓶,阴性对照各一瓶,其中HT-29给药浓度为21μmol/L,SW480给药浓度为48μ mol/L,五瓶细胞分别用药物干预6h、12h、24h、36h和48h,提取mRNA,用实时定量PCR检测mRNA水平的变化。2.利用蛋白免疫印迹(Western-blot)检测药物处理肿瘤细胞后VEGF和β-catenin蛋白质水平的表达变化:每种细胞传5瓶,药物干预的时间为6h、12h、24h及48h,浓度同PCR。
结果:在mRNA表达水平,姜黄素处理HT-29细胞株,6h、12h、24h、36h和48h后,与对照组相比,β-catenin表达水平则为其1.04、0.40、0.31、0.29和0.27倍,VEGF表达水平为其0.93、0.47、0.36、0.32和0.30倍;姜黄素处理SW480细胞株6h、12h、24h、36h和48h后,与空白对照相比,β-catenin表达水平则为其0.91、0.45、0.34、0.27和0.14倍,VEGF表达水平为其0.91、0.42、0.32、0.30和0.09倍,除外6h,差异有统计学意义(P<0.05)。
在蛋白质水平,姜黄素处理SW480细胞株6h、12h、24h和48h后细胞中VEGF及β-catenin表达情况分别为:2.2665±0.2774、1.9037±0.3051、1.5531±0.2461、1.1719±0.2718和0.7716±0.2486;0.924±0.1477、0.6868±0.1115、0.4730±0.1498、0.2818±0.1308和0.0920±0.0447。姜黄素处理HT-296h、12h、24h和48h后细胞中VEGF及β-catenin表达情况分别为:1.2236±0.2345、0.9126±0.2091、0.6763±0.1807、0.4442±0.1947和0.2112±0.0967;0.9742±0.1601、0.7736±0.1309、0.5461±0.1564、0.3845±0.1361和0.2372±0.1264。通过统计学处理,除6h外,干预组与对照组比较均有统计学意义。
结论:姜黄素可抑制大肠癌体外培养细胞株HT-29及SW480中的β-catenin及VEGF的基因及蛋白表达。