1997年以来我国华南和华东部分地区发生了由新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）导致的鹅的临诊疾病，而且发现鹅源NDV在体外具有比鸡源和鸽源毒株更强的致细胞融合的能力，这表明NDV的抗原可能发生了变异。为了对该病毒的抗原变异进行初步的研究探索进而建立新的NDV检测方法，我们研制了针对基因Ⅷ型NDV的单克隆抗体（简称单抗）。 以基因Ⅶ型NDV鹅源毒株ZJ1作为免疫原，三次免疫8周龄BALB／c小鼠后，取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2／0-Ag-14进行融合，通过间接酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）和血凝抑制试验（hemagglutinin inhibition, HI）对杂交瘤进行双重筛选，经亚克隆后，共获得6株针对NDV的特异性单抗，分别命名为：1H6、2G5、3A4、3B5、6B1和8C5。其中2G5、3A4、3B5、6B1和8C5单抗具有血凝抑制特性，腹水的HI效价分别为：2¹⁴、2¹²、2⁹、2¹⁵和2⁸，分别属于IgG₁、IgG₁、IgG_2b、IgG₁和IgG₁亚类，间接ELISA效价均大于1×10⁵，间接免疫荧光试验（indirect immunofluorescent assay, IIFA）效价均大于1×10⁴。无HI特性的单抗1H6为IgG₁亚类，其腹水的ELISA效价也大于1×10⁵，IIFA效价为1×10³。上述六株单抗所针对的抗原表位均位于血凝素-神经氨酸酶（hemagglutinin-neuraminidase, HN）蛋白上，除1H6没有中和特性外，其余5株单抗均具有中和NDV的能力。 用过碘酸钠氧化法，将上述6株单抗及本室保存的另外两株NDV单抗M22和F23偶联标记辣根过氧化物酶，然后进行竞争ELISA试验，结果发现8株单抗针对HN蛋白上的四个不同抗原区，2G5、3A4、3B5和6B1属于同一抗原区，M22扬州大学硕士学位论文和F23同属于另一抗原区，8C5和IH6分别单独属于一个抗原区。针对同一抗原区的单抗之间存在相互竞争，不同抗原区的单抗之间无竞争现象。 用具有Hl特性的5株单抗，对我室保存的50多个NDV毒株进行排谱试验，结果表明:2G5、3A4、3B5和6BI四株单抗的反应谱比较一致，但它们与8C5单抗的反应谱明显不同。另外，五株单抗与鹅源NDV毒株的反应性较强，而与鸽源NDV毒株的反应性较弱。 用单抗6BI作为一抗，建立了nFA方法，可以有效地进行NDV强毒株的检测，而且特异性好。以不同的单抗包被酶标板，再与辣根过氧化物酶标记的不同单抗进行交叉ELISA试验，筛选出了两个新的夹心ELISA系统，即M22一8C5和2G5-8C5系统，然后与本室原来建立的M22一F23系统同时对NDV毒株排谱，发现新建立的2G5。8C5系统对鸽源NDV毒株的反应性相对较弱，而与鹅源NDV毒株的反应性较强，这与Hl排谱试验结果相符，所以该系统可用于鹅源NDV的检测。另外，三个系统对大部分NDV毒株的反应性比较好，而对于少部分毒株，不同的系统对它们的反应特性不尽相同，但总的来说，M22一8C5系统能与所有的NDV毒株反应，因此更适合于试剂盒的组建并显示出了相当好的应用前景。