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目的:探讨穿心莲内酯对人膀胱癌细胞株(T24、5637细胞)体外的抑制作用及其相关机制,为穿心莲内酯在膀胱癌中的临床应用提供理论依据。方法:使用不同浓度梯度的穿心莲内酯处理膀胱癌细胞株,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测穿心莲内酯对T24和5637细胞的增殖抑制作用;穿心莲内酯作用于肿瘤细胞24小时后,通过普通光学显微镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学变化;通过细胞平板克隆实验是通过观察不同穿心莲内酯浓度下膀胱肿瘤细胞形成群落的数量;利用流式细胞技术检测不同药物浓度下T24、5637细胞凋亡情况,分析穿心莲内酯对膀胱癌细胞周期的影响;通过蛋白质免疫印迹实验检测穿心莲内酯对P53,Caspase3,PARP1,Caspase9凋亡蛋白水平的影响。结果:穿心莲内酯能有效抑制T24与5637膀胱癌细胞活力和增殖能力,二者存在着剂量效应关系,细胞增殖率随着药物浓度的增加而减小;穿心莲内酯作用于肿瘤细胞24小时后,通过普通光学显微镜观察可见对照组细胞生长良好,细胞胞体饱满、胞质丰富、胞核完整,而加药组表现为细胞贴壁不良,死亡细胞数量增多,存活细胞出现明显的细胞形态改变;随着穿心莲内酯药物浓度的增加,T24与5637细胞增殖和成克隆能力进行性下降;流式细胞术检测结果显示,相比对照组,随着穿心莲内酯药物浓度的增加,T24与5637细胞均表现出早期凋亡细胞比例的增加。细胞凋亡率与对照组相比较有显著上升,不同浓度的药物下肿瘤细胞的细胞凋亡率比较具有统计学差异(P<0.05);穿心莲内酯可通过诱导膀胱癌细胞G1细胞周期停滞,促进膀胱癌细胞早期凋亡的方式来抑制体外膀胱癌细胞的增殖;随着穿心莲内酯浓度升高,P53蛋白表达增加,PARP1蛋白表达减少,Caspase3与Caspase9蛋白表达增加。结论:穿心莲内酯在一定浓度范围内能够抑制膀胱癌T24、5637细胞增殖,具有明显的剂量效应关系;其对膀胱癌细胞的抑制作用可能是通过细胞周期阻滞以及激活内源性线粒体细胞凋亡途径来实现的。