【摘 要】
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油橄榄（Olea europaea L.）是著名的木本油料植物,在世界范围内广泛种植,我国油橄榄总面积达8万hm2,其果实主要用于生产橄榄油。随着我国油橄榄产业的发展,油橄榄叶大量产生,对其开发利用势在必行。油橄榄叶因其丰富的酚类成分受到关注,其中尤以羟基酪醇活性最为突出。因此,本研究以油橄榄叶为原料,通过酸水解提取、大孔树脂纯化来制备羟基酪醇,通过体外抗氧化模型和模式生物秀丽隐杆线虫（Caeno
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油橄榄（Olea europaea L.）是著名的木本油料植物,在世界范围内广泛种植,我国油橄榄总面积达8万hm2,其果实主要用于生产橄榄油。随着我国油橄榄产业的发展,油橄榄叶大量产生,对其开发利用势在必行。油橄榄叶因其丰富的酚类成分受到关注,其中尤以羟基酪醇活性最为突出。因此,本研究以油橄榄叶为原料,通过酸水解提取、大孔树脂纯化来制备羟基酪醇,通过体外抗氧化模型和模式生物秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）评价其体内外抗氧化活性及作用机制,以期为油橄榄叶的高值化开发利用提供理论依据和技术支撑。主要研究结果如下:1.油橄榄叶片中橄榄苦苷含量远高于游离态羟基酪醇,且通过提取方法的对比发现超声辅助能提高羟基酪醇得率,故本试验选用超声辅助盐酸水解油橄榄叶提取羟基酪醇。其最佳提取工艺条件为:温度50℃、时间120 min、盐酸浓度1.6 mol/L、液料比60:1 mL/g。该条件下,实际得率为14.11 mg/g,与理论预测值无显著性差异,说明该工艺稳定且高效。2.比较八种大孔树脂对羟基酪醇的吸附、解吸率,选用NKA-Π型树脂来进行纯化。最佳工艺条件为:上样体积250 mL、速度1.5 mL/min,水洗后用75%乙醇进行洗脱,洗脱体积40 mL、速度1 mL/min。纯化后羟基酪醇纯度为9.25%,与纯化前的纯度2.27%相比,富集倍数为4.07倍,回收率为91.65%。3.羟基酪醇对DPPH·自由基的清除率高达84.81%,还原力也达到同浓度Vc的89.95%;对于H2O2诱导的氧化损伤CHO细胞,能使其ROS及MDA含量分别降低15.62和35.54%,细胞活力提高35.84%。表现出较强的体外抗氧化活性。4.在线虫处于热应激状态时,羟基酪醇能激活DAF-16并促进其入核,增加SOD-3::GFP与HSP-16.2::GFP的表达量,使SOD及GSH-Px的活性分别提高42.86%和35.86%,从而使ROS及MDA含量分别降低21.79%和36.00%,线虫存活率提升15.79%,表现出较强的体内抗氧化作用。同时,qPCR结果显示:羟基酪醇能抑制IIS信号,降低上游组件daf-2及age-1的表达,减少对下游组件daf-16的抑制,从而促进daf-16及其靶基因sod-3的表达,表明羟基酪醇可能通过影响IIS信号通路而调节线虫的抗氧化能力。
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