IL-4和IL-13对支气管上皮细胞上CXC趋化因子受体CXCR4表达的影响

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研究背景:CXCR4存在于机体多种细胞表面,是趋化因子SDF-1α的特异性受体,在细胞的增殖和迁移中起着重要作用。有研究证实CXCR4及其配体SDF-1α参与了哮喘的气道炎症和气道高反应,在哮喘中发挥重要作用。Th2细胞因子IL-4和IL-13在哮喘的发病机制过程中扮演了重要角色,嗜酸性粒细胞表面CXCR4的表达在IL-4和IL-13的影响下有所改变。而哮喘中支气管上皮细胞是否表达CXCR4以及其表达是否受Th2细胞因子IL-4和IL-13的影响,目前尚未有研究报道。目的:探讨支气管上皮细胞在Th2细胞因子环境下是否表达CXCR4以及其表达是否受IL-4和IL-13的影响。方法:本实验通过用六孔板培养人支气管上皮细胞系,饥饿16h,然后用IL-4(20ng/ml)和IL-13(20ng/ml)分别及联合刺激支气管上皮细胞24h,形成Th2细胞因子环境,以体外模拟哮喘环境。通过提取蛋白,电泳,把丙烯酰胺凝胶中的蛋白转移到PVDF膜上,封闭1h,CXCR4单克隆抗体抗体孵育过夜,洗涤后加入二抗孵育1h,洗涤,ECL显色、曝光。结果:正常组HBEsCXCR4蛋白表达灰度比值为(0.54±0.07),而IL-4刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为(0.91±0.07),明显高于正常组(P<0.05),具有统计学差异。IL-13刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为(1.11±0.11),与正常组比较,也明显增高(P<0.05),差异具有统计学意义。IL-4+IL-13联合刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值(1.19±0.18),明显高于正常组(P<0.05),具有统计学差异。结论:该实验结果表明哮喘环境中支气管上皮细胞表面CXCR4蛋白表达上调,Th2细胞因子IL-4和IL-13均可使支气管上皮细胞表面CXCR4表达增高,说明其表达受到Th2细胞因子的调控。
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