万宁天然海防林不同植物类型土壤微生物多样性分析

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海南岛人工海防林主要以木麻黄树种为主,与天然海防林相比,存在天然更新能力差,防护期较短,且受台风影响防护效能差,经营成本高等问题,因此迫切需要对木麻黄海防林进行更新改造。若要对木麻黄海防林进行更新改造,筛选出天然更新能力强,适应海岸生态条件,耐土壤贫瘠等优良特性的海南本土树种是最为重要的一个环节。在对海南本土树种初步筛选的基础上,本文拟通过对不同植物类型土壤理化性质的分析,土壤微生物群落多样性的分析,探讨植物--微生物--土壤三者之间的关系,以便揭示不同植物类型对土壤微生物多样性的影响,并寻找对土壤微生物多样性影响明显的植物类型,即从土壤微生物与植物类型之间关系进一步筛选海防林林替代树种。该项研究将为海防林替代树种的筛选提供新的研究思路与方法。研究方法:基于对海南岛海防林替代树种的初步筛选,选择了万宁沿海三个地区共八种植物类型:马骝角的草海桐(Scaevola sericea)、岭南山竹子(Garcinia oblongifolia)、刺葵(Phoenix hanceana)、蕨类植物+野牡丹+桃金娘(灌草丛;shrub-meadow);日月湾的对叶榕(Ficus hispida)、榄仁树(Terminalia catappa)和南燕湾的白楸(Mallotus paniculatus)、马鞭草科的越南牡荆(Vitex tripinnata)。土样采集分别在旱季和雨季进行,雨季取样选在2013年10月,旱季取样选在2014年4月。土壤取样是在选定植物周围距离根部1m以内,采集0~10cm和10~20cm两个土层的土样,然后根据五点混合法混合成一个混合土样。采用常规方法测定土壤物理性质(含水率)、化学性质(有机质、全氮、全磷、全钾、铵态氮、硝态氮、有效磷、速效钾、p H)。采用BIOLOG微平板计数法测定分析不同植物类型土壤微生物功能多样性,在此基础之上,进一步应用了最能全面解析土壤微生物群落多样性的宏基因组——Miseq测序方法。主要在门和属水平下分析土壤微生物多样性和丰度指数,指出不同植物类型土壤微生物群落结构组成的差异性。采用多项指标综合分析不同植物类型的土壤微生态环境,筛选沿海地区海防林潜在的替代树种。主要研究结果:1.不同植物类型对土壤理化性质的最高值有影响。岭南山竹子的土壤有机质含量最高;越南牡荆的全氮和全钾含量最高;对叶榕的全磷和硝态氮含量最高;有效磷、速效钾、铵态氮等含量最高的分别是白楸、刺葵和灌草丛。说明植物类型是导致土壤理化性质差异的因素之一;2.根据土壤微生物对单一碳源利用能力和多样性指数较为优越或独特的特性,综合分析0~20cm不同植物类型土壤微生物功能多样性,结果表明白楸和对叶榕优势种群对总体碳源利用能力较高,榄仁树和灌草丛对总体碳源利用能力较弱;3.土壤理化性质和土壤微生物对单一碳源总体利用能力的综合分析显示:上层土的土壤养分和土壤微生物功能多样性较下层土的高;土层对土壤物理、化学性质的影响因植物类型而存在差异;不同季节土壤理化性质的变化与植物类型及土壤理化性质本身有关;4.根据高通量Mesiq测序结果,七种植物类型获得有效序列数273454条,序列数从大到小排列顺序为:榄仁树,对叶榕,刺葵,白楸,岭南山竹子,越南牡荆,灌草丛;在0.97的相似度下共获得6658个OTUs,其中榄仁树最高,白楸最低;根据OTU丰度进行的PCA分析,榄仁树、对叶榕、刺葵,它们的多样性较为相近,越南牡荆和灌草丛的多样性较为相近,白楸、岭南山竹子与其他植物类型的多样性较远,说明同一地区不同植物类型的群落多样性存在差异。通过不同植物类型土壤微生物多样性及土壤微生物在各分类水平上的百分比综合分析显示,日月湾的榄仁树和对叶榕的多样性和丰度最高,因此榄仁树和对叶榕是土壤微生物群落多样性较丰富的树种;且它们蕴含的未知序列较大,所以作为开发特殊微生物的树种的潜力最大。总之,土壤理化性质、土壤微生物功能多样性、土壤微生物群落多样性都随植物类型的不同有不同的变化。在同一取样区,土壤养分、土壤微生物群落多样性较高的植物类型分别是:日月湾的榄仁树;马骝角的刺葵;南燕湾的越南牡荆。从不同植物类型上分析,土壤微生物群落多样性从高到低的总体排序为:榄仁树、对叶榕、刺葵、岭南山竹子、灌草丛、越南牡荆、白楸。
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