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目的: 对北盘江-红水河流域艾纳香的资源分布、生境进行调查分析,并结合艾片得率、有效成分L-龙脑及毒性成分樟脑和异龙脑含量、艾片的化学组成及其外源性毒性成分评价艾纳香及艾片的质量,从而为艾纳香的栽培和艾片的临床应用提供指导。并利用药效学和代谢组学的方法,评价艾片质量控制的合理性,也为艾片的资源开发利用提供依据。 方法与结果: 1.艾纳香的资源调查:通过实地调查了解北盘江-红水河流域艾纳香的资源分布和生长环境,发现艾纳香多生长在偏碱性的粗骨土中。对收集到的61批不同产地艾纳香采用水蒸气蒸馏法提取艾片,计算艾片得率,并结合艾纳香生长环境进行比较分析,发现海拔为416m~884m、偏碱性的粗骨土中产艾纳香提取艾片的得率较高。 2.艾片的成分检测研究:参照《中国药典》2015版一部艾片标准项下规定的方法,对收集到的50批不同产地野生和栽培艾纳香提取物艾片中L-龙脑的含量进行测定,发现所有样品中L-龙脑含量大于85%的仅占22%,其中栽培艾纳香提取物艾片样品合格率为52.94%(L-龙脑含量大于85%表示合格),且合格艾片原材料艾纳香的生长土壤为粗骨土,土壤的pH在6.58~8.60之间,生长海拔为412m~621m。进一步利用GC-MS对14批样品进行化学组分分析,14批不同样品分别鉴定出7~24个化合物,仅L-龙脑、喇叭茶醇、石竹烯氧化物、γ-桉叶醇为不同样品所共有,说明艾片的化学组成差异大。 3.艾片的药效研究:通过小鼠耳肿胀、棉球肉芽肿和醋酸扭体实验,比较7批不同地区野生与栽培艾纳香提取物艾片的抗炎镇痛药效作用,发现罗甸野生的艾纳香提取物艾片抗急性炎症和镇痛效果较好,罗甸栽培艾纳香提取物艾片抗慢性炎症的效果相对较好;望谟栽培艾纳香提取物艾片的镇痛效果较差,贞丰栽培艾纳香提取物艾片对慢性炎症的抑制效果较差。总体来看,罗甸野生与栽培的艾纳香提取物艾片的抗炎镇痛药效作用均较为稳定且明显。 4.艾片的入血成分分析:通过对7批不同产区艾纳香提取物艾片经口服后进入血液中移行成分分析,发现各样品中均含有L-樟脑、L-龙脑、乙酸龙脑酯和油酸甲酯。对比体外艾片成分和入血成分,发现入血成分L-樟脑、L-龙脑和乙酸龙脑酯为艾片的原型成分,油酸甲酯为代谢成分。 5.艾片的毒性成分研究:参照《中国药典》2015版一部艾片标准项下规定的方法对艾片中樟脑和异龙脑进行检测,发现检测的艾片样品中樟脑和异龙脑均未超标。并参照《中国药典》2015版四部2341项下和2321项下规定对艾片和艾纳香中的有机氯农药残留量和重金属进行检测,发现贞丰栽培和贞丰野生艾纳香、罗甸栽培和望谟野生艾纳香提取物艾片中有机氯农药残留量超标,超标的农药是γ-六六六和五氯硝基苯。重金属检测发现贞丰栽培艾纳香样品中砷含量超标,望谟栽培艾纳香样品中镉含量超标,而艾片样品未发现超标。 结论: 1.从收集到的艾纳香药材的生长环境、艾片的得率、艾片中L-龙脑的含量等综合评价的结果,建议在北盘江-红水河流域种植艾片原料药艾纳香时,土壤类型应为偏碱性的粗骨土,种植海拨约为412m~621m。 2.在种植与采收时间一致的条件下,结合艾纳香生长环境、不同产地艾纳香提取艾片的得率及艾片化学组成的研究结果,发现生长环境是主要影响因素,所以建议在种植艾片原材料艾纳香时应选择适宜艾纳香的生长环境,并且尽量保持环境的一致性,从而确保艾片质量的稳定性。 3.通过艾片的药效研究,并结合艾片中L-龙脑的含量测定和艾片的体内外成分分析结果,发现《中国药典》方法评价艾片质量优劣与药效作用并不一致,其药效的发挥可能是各种成分共同作用的结果,提示仅以检测L-龙脑的含量来评价艾片的质量优劣值得商榷。 4.对艾片和艾纳香进行农药残留量检测和重金属检测发现艾片中存在有机氯农药超标的情况,而艾纳香中重金属超标,所以对于艾纳香种植地的选择及农药监控方面,仅只检测原药材艾纳香是不能去指导栽培和解决药材的安全性问题,应从原药材到产品的综合评价,才能保障其安全性。