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目的:自20世纪70年代以来,癌症发病率以每年2.9%的速度持续增长。儿童、青少年和年轻人的癌症发病率呈上升趋势,癌症治疗的进展提高了恶性肿瘤的治愈率,但可能会显著诱导年轻女性的性腺损害。女性肿瘤患者生育力保存是值得关注的问题。临床上常用的女性生育力保存方法-胚胎冷冻保存和成熟卵母细胞冷冻保存有其局限性,特别是对于青春期前、成年无伴侣、需紧急放化疗及不能耐受卵巢刺激的癌症患者,现有足够的证据支持将卵巢组织冷冻保存作为一种有效的技术应用于临床。本研究通过评价妇科肿瘤患者正常卵巢皮质冷冻保存后是否影响卵泡的活性,评估不同年龄和不同肿瘤类型的患者行卵巢组织冷冻保存是否有意义,更科学的为需要保存生育力的患者做出方案指导。方法:研究对象的选择:本试验为回顾性研究,卵巢组织来自于2018年12月至2020年1月于河南省人民医院妇科因各种原因需切除全部或部分卵巢组织的女性患者,取其剥离的卵巢囊肿壁上残留卵巢组织共34例,利用患者手术切除病理取材后的组织进行研究。卵巢组织通过开腹或腹腔镜手术获得,经术中冰冻切片及卵巢组织病理检查中均无癌细胞存在,患者年龄8-42岁,均签署知情同意书。病例纳入标准:有规律性的月经来潮（除儿童外）,女性性激素水平正常,近3个月内无激素使用史,未合并其他疾病者。病例排除标准:术前有放化疗治疗史者。研究方法:对获取的卵巢组织进行编号,卵巢皮质片行玻璃化冷冻后复融,通过H&E染色计算正常卵泡与异常卵泡的比率。通过免疫组化检测cleaved-caspase-3表达、AMH表达、CD31表达以评估卵巢组织活性,在×400倒置显微镜下计数,以染色强度结合阳性细胞中染色分布对免疫组化结果进行评分,按上述两者评分之和计算阳性细胞率,计算每张切片中每十个视野内阳性细胞率。实验分为两部分进行,每部分采用不同的分组方式。第一部分:女性年龄对卵巢组织冷冻效果的研究。按患者年龄进行分组,将患者分为（1）儿童期女性（4-<12岁）;（2）青春期女性（12-19岁）;（3）最佳生育期女性（20-<35岁）;（4）卵巢功能下降期女性（35-45岁）。第二部分:肿瘤类型对卵巢组织冷冻效果的研究。因各年龄组患者卵巢储备功能不同,故选取最佳生育期女性进行第二部分的研究。按患者所患肿瘤类型进行分组,将患者分为（A）卵巢巧克力囊肿患者;（B）畸胎瘤患者;（C）其他妇科肿瘤患者。计量资料用均数±标准差表示,采用独立样本t检验,检验水准α=0.05;计数资料采用χ2检验,检验水准α=0.05,以P<0.05为差异显著性判断标准。结果:卵巢组织形态学分析结果:1、冷冻卵巢组织与新鲜卵巢组织的始基卵泡的形态无显著差异,但冷冻对初级卵泡的冷冻损伤显著增加。2、冷冻复苏后的儿童卵巢组织中卵泡密度高于成人患者,且随着年龄的增长,卵泡密度显著下降。儿童期卵巢组织含有高比例的异常不生长卵泡。3、在新鲜的及冷冻复苏的卵巢组织中,儿童期女性组和卵巢功能下降期女性组的始基卵泡异常率未见明显差异,均显著高于其他两组（P<0.05）,其他两组之间的始基卵泡异常率未见显著差异,各组之间的初级卵泡异常率均未见显著差异。4、卵巢巧克力囊肿患者的卵泡密度比畸胎瘤患者及其他妇科肿瘤患者的卵泡密度低,对新鲜和解冻的卵巢组织进行了组织学结构分析,发现间质和卵泡有广泛的损伤。5、在新鲜的及冷冻复苏的卵巢组织中,不同肿瘤类型组之间始基卵泡异常率及初级卵泡异常率未见显著差异。免疫组织化学染色结果:1、新鲜及冷冻复苏卵巢组织四个年龄组Cleaved-caspase-3的表达差异有统计学意义（P<0.05）,儿童期女性组卵巢组织Cleaved-caspase-3表达显著低于其他三组（P<0.05）,卵巢功能下降期女性组卵巢组织Cleaved-caspase-3表达显著高于其他三组（P<0.05）。2、卵巢组织细胞AMH阳性率随年龄的增长而下降。新鲜及冷冻复苏卵巢组织四个年龄组AMH的表达差异有统计学意义（P<0.05）,进一步进行两两比较,每两组之间卵巢组织AMH表达差异均有统计学意义（P<0.05）。3、卵巢组织细胞CD31阳性率随年龄的增长而下降。新鲜及冷冻复苏卵巢组织四个年龄组CD31的表达差异有统计学意义（P<0.05）,进一步进行两两比较,每两组之间卵巢组织CD31表达差异均有统计学意义（P<0.05）。4、新鲜及冷冻复苏卵巢组织三个肿瘤类型组Cleaved-caspase-3、AMH、CD31的表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1、儿童卵巢组织冷冻保存有其特殊性,儿童卵巢组织卵泡密度较高,虽含有较高比例的异常卵泡,但儿童卵巢组织有大量血管的存在,可能有助于移植后的血管重建。对于儿童恶性肿瘤患者,有必要采取卵巢组织冷冻技术保留生育能力。2、卵巢功能下降期女性的卵巢功能显著下降,新鲜及复融卵巢组织始基卵泡及初级卵泡异常率显著增高,卵巢组织冷冻获益有限,提倡性腺损伤高风险的女性患者尽早行生育力保存技术保护生育能力。3、不同肿瘤类型组之间始基卵泡异常率及初级卵泡异常率无显著差异,提示肿瘤类型较少影响卵巢功能,卵巢组织冷冻技术适用于多种肿瘤类型患者的生育力保存。