压应力通过调节SREBP-1/小凹蛋白-1信号通路促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞胆固醇蓄积

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目的:观察压应力对平滑肌细胞胆固醇蓄积的影响及其与SREBP-1/Caveolin-1信号通路的关系。 方法:首先以血管平滑肌细胞(A10)为研究对象,不同压应力(0,60, 90,120,150,180mmHg)作用下,以50mg/Lox-LDL作用于平滑肌细胞48小时,油红O初步检测细胞荷脂情况,高效液相色谱分析法检测细胞内游离胆固醇,总胆固醇含量;并计算胆固醇酯/总胆固醇的值,RT-PCR检测caveolin-1,SREBP-1,ApoE的mRNA的表达情况Western 印迹法检测caveolin-1,SREBP-1,SR-B1蛋白的表达情况, 结果:在不同压应力(0,60,90,120,150,180mmHg)作用的条件下,ox-LDL诱导血管平滑肌细胞48小时,油红O染色,观察到细胞仍为长梭形,但是随着压力的增加,细胞胞浆体积扩大,脂滴明显增多。细胞内游离胆固醇的含量分别为60.5±2.8,71.2±3.4,90.1±9.1,110.5±22.1,133.5±11.1,150.8±9.4mg/g,总胆固醇的含量分别为92.3±2.1,122.8±12.3,163.8±9.9,245.6±7.8,317.9±5,386.7±6.4mg/g,胆固醇酯/总胆固醇的比值分别为30℅,42﹪,45﹪,55﹪,58﹪.61﹪. RT-PCR检测发现压应力使caveolin-1,SREBP-1,ApoE mRNA的表达明显下调。 Western blotting检测caveolin-1,SREBP-1,SR-B1蛋白的表达均下调。 结论: 1.压应力能促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞胆固醇蓄积。 2.压应力可能通过调节SREBP-1/caveolin-1信号通路和ApoE的表达来促进血管平滑肌细胞胆固醇蓄积。
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