【摘 要】
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基因治疗为关节炎的治疗提供了一条新的途径,为探讨有效基因转移入关节的方法及细胞因子hIL-1ra及hIL-10在骨性关节炎治疗中的作用,我们进行了两部分实验.1.构建PLXRN-IL-1Ra
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基因治疗为关节炎的治疗提供了一条新的途径,为探讨有效基因转移入关节的方法及细胞因子hIL-1ra及hIL-10在骨性关节炎治疗中的作用,我们进行了两部分实验.1.构建PLXRN-IL-1Ra、PLXRN-IL-10逆转录病毒载体,体外感染同种异体原代滑膜细胞,接着将转染了外源基因的滑膜细胞行关节腔注射入创伤性骨关节炎兔膝关节,通过对关节滑液的ELISA分析证明外源基因的表达在基因转移后14天还很稳定,只接受hIL-1Ra基因治疗的膝关节软骨损坏明显减轻,接受hIL-10基因治疗的膝关节治疗也有一定效果,当两种基因同时导入时,有非常明显的抑制软骨破坏和软骨基质降解的作用.另外,当同时转移入hIL-1Ra和hIL-10两种基因时,hIL-1Ra的表达比单独接受hIL-1Ra的膝关节要高,说明同时基因转移有可能增加某些基因的表达.2.以具有高度生物相容性、可降解性和粘膜粘附性及几乎无毒、无副作用的生物多聚糖Chitosan为载体,通过选择pH5.7和浓度为0.02％的溶液,利用高速震荡法制备Chitosan-DNA超微颗粒.用制备的Chitosan-pEGFP超微颗粒进行原代滑膜、软骨细胞的体外转染,证实该复合物能同细胞表面结合,并被内吞进入胞内:在该复合物和细胞共同孵育36小时后,复合物所携带的质粒DNA中的绿色荧光蛋白基因开始表达,这种表达具有随时间延长而转染效率和表达效率提高的特点;在转染后第5天,表达效率和转染效率最高;且对软骨细胞的转染能力较强,在滑膜细胞中弱表达.
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