牛粪制卧床垫料过程中物料特征及病原活菌检测方法研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:cgogovocom
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,随着人们生活水平的不断提高,对肉制品、奶制品等的需求增加,促进了我国养殖业迅速发展。牛粪是奶牛养殖过程中不可避免的污染物,大量的牛粪若不经处理直接排放,不仅会对周边环境造成污染,还会对人类的健康产生威胁。如何快速有效地处理牛粪成为一项亟待解决的关键问题。牛粪中含有可被微生物利用的有机成分及纤维素,具有转化成奶牛卧床垫料的潜能。近几年新兴起的滚筒式好氧发酵处理技术-BRU(Bedding Recovery Unit)卧床垫料再生系统,具有处理耗时少,占地面积小,并能在处理过程中去除病原菌的优点,但是目前国内外仍缺少对BRU系统实际运行过程中物料性质及其中重金属及粪大肠菌群等污染物的系统性研究,致使该技术无法大范围推广。为了考察奶牛场粪污制备卧床垫料过程中的牛粪性质及相关污染物含量的周年变化规律,本研究选择天津市一家规模化奶牛养殖场作为研究对象,进行不同阶段、不同季节的连续采样,并对样品中的TN、TP、pH、含水率、有机质、粪大肠菌群和Cu、Zn等重金属进行了系统检测分析。检测数据分析显示:泌乳牛牛粪中的TN、TP、VS、Cu、Zn的排放量存在显著性季节差异(P<0.05),且TN、TP、Cu、Zn、Cd的排放量均以冬季最高;经过BRU好氧发酵处理后,再生固体牛粪中的含水率、重金属Zn和粪大肠菌群的含量出现不同程度的降低,而TN、TP和重金属Cu的含量则基本呈现升高趋势。本研究将PMA(叠氮溴化丙啶)与qPCR相结合,建立了PMA-qPCR定量检测方法,以实现对再生固体牛粪(Recycled Manure Solid,RMS)中病原菌活菌的定量检测。PMA的选择性功能与菌株种类有关,故选取了一株革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和一株革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)进行试验,分析PMA的作用条件。对PMA作用的光反应时间、最低效应浓度、不影响活菌扩增的浓度等因素进行了试验。通过试验分析发现OD600值为0.5左右的大肠杆菌,在光反应时间为1min,PMA浓度为60μg/mL时,即可抑制样本中膜损伤菌DNA的扩增。当PMA浓度升至100μg/mL时未对活菌产生影响。OD600值为0.5左右的金黄色葡萄球菌在光反应时间为1min,PMA浓度为65μg/mL即可抑制样本中膜损伤菌DNA的扩增。当PMA浓度升至100μg/mL未对金黄色葡萄球菌活菌产生影响。本研究设计构建了针对大肠杆菌uidA基因和金黄色葡萄球菌nuc基因特定序列的质粒标准品,建立的标准曲线R2分别为0.993和0.998,为PMA-qPCR方法的稳定性提供了保证。将PMA-qPCR方法应用于牛粪卧床垫料样本,发现使用单层无菌纱布对再生固体牛粪悬浊液进行过滤预处理可以去除大部分颗粒物,且未对样品中的菌含量产生显著性影响(P>0.05)。使用PMA-qPCR对BRU系统处理前后样品进行检测发现其对样品中活菌有去除效果且效果较好。使用PMA-qPCR方法检测牛粪卧床垫料样品是对奶牛场垫料活性致病菌定量检测的一次成功尝试。PMA-qPCR技术能够有效、快速地区分活菌和死菌,实现对病原菌活菌的定量。该技术还可推广至其他环境性致病菌,在其它环境样品中致病菌活菌定量检测领域将有更广阔的发展前景。
其他文献
高校图书馆的阅览座位作为一种学校的公共教育资源,学生应该平等地享有利用这些资源的权利,而目前国内大部分高校图书馆都面临着严重的读者占座问题。分析了读者占座的原因与
《玫瑰门》独特的叙述艺术赋予这部小说特殊的魅力,儿童的叙述视角使小说具有戏剧性的效果,而人物内视点聚焦则全方位地展现出人物的性格特征,叙述者和人物的精神对话试图全
<正>有商人萧百佑自云:"三天一顿打,孩子进北大",每鞭挞其子女,而三子皆学于北大。又有北大、清华二推荐生,曰朱铌、时羽剑,二人之父甚和于之。故萧号曰"狼爸",而朱、时之父
期刊
音乐教育是素质教育的重要组成部分,笔者通过对布局调整后农村小学音乐教育现状所做的各种调查数据的对比分析,提出了解决农村中小学音乐教育现状的建议和对策。本文从坚持布
行政处罚是最为重要的行政行为之一,同时它也是每个行政机关最为有力的行政管理手段。在行政处罚中由于主客观多方面的原因,使行政处罚的行使必然会伴生着自由裁量权。海事行
为了解身处特殊生存环境的牦牛脾脏的结构特征,采用解剖学和组织学的方法分别对10头成年牦牛的脾脏进行了观察,同时对牦牛脾脏的长度、宽度、厚度、质量以及被膜厚度、小梁面
渔业是我国重要的基础产业,同时也是世界上公认的弱势产业。由于市场经济自身的局限性导致作为准公共物品的渔船保险服务存在不足。我国应当充分借鉴域外优秀的渔船保险立法,并
随着我国经济的高速发展,我国的社会结构、社会关系、生活方式等方面都发生着迅速而又巨大的变化,各种社会矛盾、冲突交织在一起,道德问题的缺失是不得不重视的一个方面,而现
本文采用定量的方法对沪上外来务工人员子女的跨文化适应过程进行了研究。针对研究对象发放问卷109份,收回问卷109份,其中有效问卷107份。利用SPSS18.0进行描述性统计和相关性
近些年来,我国正在加紧步伐建设服务型政府,提升公共服务能力是建设服务型政府的关键举措。随着现代生活水平的提高,公众对各种公共需求总的数量在增加,对公共服务的质量要求也在