论文部分内容阅读
目的:流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,传染性强,发病率高,致病力强,易发生变异,若人群对变异株缺乏免疫力,容易引起爆发流行或大流行,严重影响了人们的生活和社会经济的发展。因此,防治流行性感冒成为研究热点。本研究探讨了众生丸对感染不同亚型流感病毒小鼠的保护作用及机制研究,为众生丸应用于流行性感冒提供科学的证据,为研究有效防治流感病毒的药物提供方法参考,为流感患者提供一种可有效防治流感的廉价中成药,以应对日益严峻的社会公共卫生安全危机。方法:分别以浓度为15个小鼠半数致死量(LD50)的H1N1、H5N1和H9N2(禽)流感病毒滴鼻感染小鼠致小鼠病毒性肺炎模型、以浓度为2个LD5的H1N1、H5N1和H9N2(禽)流感病毒滴鼻感染小鼠致小鼠死亡模型以及以浓度为100个鸡胚半数感染量(EID50)的H5NI禽流感病毒接种鸡胚致鸡胚体外死亡模型,通过SPSS11.0统计软件进行单因素方差分析比较给药众生丸组和给药阳性药组、病毒模型组之间各指标的差异。(1)众生丸体内对H9N2禽流感病毒的作用的评价指标:比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺指数抑制率和小鼠死亡模型的死亡保护率、生命延长率。(2)众生丸体内对H5N1和HINI禽流感病毒的作用评价指标:比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺指数抑制率和小鼠死亡模型的死亡保护率、生命延长率、肺组织形态、小鼠眼球静脉血的加抗凝剂全血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+的百分比的差异以及小鼠眼球静脉血的不加抗凝剂分离的血清中细胞因子TNF-a、IFN-γ及IL-10的情况差异。(3)众生丸鸡胚体外对H5NI禽流感病毒的作用:以众生丸与H5NI禽流感病毒等量作用60min和120min,比较不同浓度的众生丸对H5NI禽流感病毒的抑制效果。结果:众生丸对H9N2禽流感病毒的作用:与病毒对照组比较,众生丸高剂量和临床剂量提取物对H9N2禽流感病毒所致小鼠肺炎病变均有明显的抑制作用(P<0.01),低剂量组肺指数低于病毒对照组;众生丸各剂量组均有能提高存活率和延长生命存活时间的趋势。众生丸对H5N1禽流感病毒的作用:与病毒对照组比较,众生丸低剂量对于H5N1禽流感病毒所致小鼠肺炎病变有明显的抑制作用(0.01<P<0.05),高剂量组对小鼠肺指数有一定降低作用(P>0.05);众生丸高剂量组、低剂量组明显提高CD3+T细胞亚群百分率(P<0.01),高剂量组同时能明显提高CD4+T细胞亚群百分率(P<0.01)但提高CD3+T细胞亚群、CD4+T细胞亚群的百分率低于达菲组;众生丸高剂量组明显降低TNF-α的含量(P<0.01),且显著优于达菲组(P<0.05),众生丸高、低剂量组、达菲组均有提高小鼠血清IFN-Y、IL-10含量的趋势(P>0.05),其作用优于达菲组(P>0.05);达菲组、众生丸各浓度组小鼠肺组织的肺间质、肺泡内炎症明显减轻,支气管上皮细胞变性、支气管壁不完整等情况均显著减轻。同时,100mg/ml的众生丸溶液在室温条件下,与100EID50/0.1ml H5N1禽流感病毒等量作用120min,可完全杀灭H5N1亚型禽流感病毒。众生丸对H1N1禽流感病毒的作用:与病毒对照组比较,众生丸组与连花清瘟组均能显著降低H1N1感染小鼠的肺指数(P<0.01),且抑制率均高于阳性药,中剂量组能显著延长存活时间(P<0.01),提高存活率,连花清瘟组、高剂量组和低剂量组均有提高存活率和延长生命存活时间的趋势(P>0.05);众生丸各组肺泡浸润现象亦显著减轻,效果与达菲相当;众生丸各剂量组小鼠胸腺指数及脾指数较病毒组显著升高(P<0.01),且与达菲相比无显著性差异;众生丸各组均能明显提高CD4+T细胞亚群含量(P<0.01),与达菲组比较,低剂量组提高CD’+T细胞亚群含量低于达菲组(P<0.01);众生丸中剂量、高剂量组能显著提高CD8+T细胞亚群含量(P<0.01),低剂量组有提高CD8+含量的趋势,但无显著性差异(P>0.05);众生丸各组使小鼠血清IFN-Y含量升高(P<0.05);众生丸中、高剂量组、达菲组能显著提高小鼠血清IL-10含量(P<0.01),高剂量组提高IL-10的含量显著优于达菲(P<0.01)。结论:实验结果提示,众生丸在体内和体外具有一定的抗H1N1、H5N1和H9N2禽流感病毒的作用,其抗H9N2和H5N1禽流感病毒的作用弱于达菲,但众生丸高剂量抗H1N1禽流感病毒的作用略强于达菲。众生丸可通过调整T细胞亚群百分率而调节机体免疫功能;通过抑制TNF-α的过量产生而减轻病毒感染引起的免疫病理损害;通过促进血清中IFN-γ产生,从而增强TH1细胞的活性而增强CTL、NK和巨噬细胞对病毒的清除;通过提高IL-10含量,抑制免疫应答,从而减轻病毒感染后所出现免疫病理损害,起到对机体的保护作用。众生丸虽然在提高CD3+T细胞亚群、CD4+T细胞亚群百分率与达菲有一定差距,但众生丸能通过抑制TNF-α的过量产生而减轻病毒感染引起的免疫病理损害而达菲不能抑制TNF-α的产生。