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实验室前期研究表明,油茶蒲醇提物具有强抗氧化、抑制肿瘤细胞增殖、抑制小鼠腹水Si80瘤生长,降脂减肥的功能。小范围试用人群表明,油茶蒲醇提物能减轻前列腺增生的症状。本文重点研究了油茶蒲醇提物对5α-还原酶的抑制能力以及它对与此酶相关的前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)的作用。主要的研究内容和结果如下:(1)通过比较精密度、回收率和稳定性,确定采用香草醛-冰醋酸-高氯酸法测定提取物中总皂素,Folin-Ciocalteau法测定总酚,紫外法测定总黄酮。油茶蒲醇提物中含27.35%皂素,22.41%多酚,2.81%黄酮;正丁醇相中皂素含量最高,达44.05%;乙酸乙酯相中多酚含量最高,达35.34%。正丁醇相过D101树脂,经乙醇梯度洗脱后,多酚主要集中在20%乙醇(20AL)和40%乙醇(40AL)洗脱相中,皂素在各个洗脱相中均有分布。(2)利用分光光度法建立5α-还原酶的体外筛选模型:睾酮20μM, NADPH 40μM,酶提取液216μg,在含有DTT 1 mM,磷酸钠40 mM, pH6.5的缓冲溶液中,37℃反应4 min。在此条件下加入10μg/mL醇提物体,·体系内5α-还原酶的剩余活性(RA)为54.92%±9.31%;乙酸乙酯相和正丁醇相抑制酶活的能力都增强,同浓度下RA分别为30.58%+0.65%和20.71%±0.54%;正丁醇相的乙醇洗脱物中40AL活性明显增强,RA仅为3.18%±2.81%。(3)在丙酸睾酮致大鼠前列腺增生模型中,油茶蒲醇提物可降低大鼠前列腺重、前列腺指数,增加第22天的尿流量(高剂量组P<0.05),降低前列腺上皮细胞的高度。在肥胖小鼠模型中,油茶蒲醇提物中剂量组(P<0.05)和高剂量组(P<0.01)均显著地降低肥胖小鼠的前列腺指数。(4)油茶蒲醇提物可抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖,48 h半抑制浓度IC50为151.6μg/mL;正丁醇相抑制PC-3细胞的能力增强,48 h的IC50为54.8μg/mL;正丁醇相过D101大孔树脂后,20AL和40AL的抑制活性减弱,60%乙醇洗脱相(60AL)和80%乙醇洗脱相(80AL)的活性增强;60AL和80AL在48h的IC50分别为43.0μg/mL和28.1μg/mL。通过形态学观察和吖啶橙染色可以发现,60AL和80AL可以诱导PC-3细胞凋亡。综上所述,油茶蒲醇提物可有效地抑制5α-还原酶的活性,改善丙酸睾酮致前列腺增生大鼠和肥胖小鼠前列腺增生的症状,抑制PC-3细胞的增殖,诱导癌细胞凋亡。