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背景及目的慢性脑低灌注(Chronic cerebral hypoperfusion,CCH)这一病理状态存在于阿尔茨海默病(Alzhimer’s disease,AD)、血管性痴呆(Vascular dementia,VaD)等疾病过程中,可导致不同程度的认知功能障碍。CCH相关认知障碍的发病机制和干预措施一直是研究的热点。本实验构建慢性脑低灌注老年SD认知功能障碍大鼠模型,并给予烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD~+)干预,初步探究NAD~+对模型大鼠认知功能障碍的保护机制,可能和NAD~+调控线粒体自噬有关。方法1.老年SD大鼠20只,随机选取5只单独用于脑血流监测(不再参与后续其他检测)。2.剩余15只大鼠随机分为3组(每组5只大鼠):假手术组(简称sham组);慢性脑低灌注组(简称CCH组);慢性脑低灌注NAD~+干预组(简称NAD~+组)。CCH组用改良后两步双侧颈总动脉结扎法(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)构建CCH模型大鼠;NAD~+组用造模成功的CCH大鼠腹腔注射β-NAD溶液(250μg/g/d,PH=7),持续4周。3.采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠空间学习记忆能力。4.利用激光散斑血流仪(Laser Speckle Contrast imaging,LSCI)监测大鼠脑血流(cerebral blood flow,CBF)。5.使用NAD~+/NADH试剂盒检测海马NAD~+/NADH比值。6.采用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测海马APP、TOMM20、LC3B、P62、SIRT1、PGC-1α、PINK1、Parkin表达量。结果1.CCH组较Sham组第2、3、5天的逃避潜伏期(51.35±5.58vs33.70±7.66,54.10±8.89vs23.15±11.03,54.25±9.25vs20.10±17.01,均P<0.05)均延长且差异有统计学意义;NAD~+组较CCH组的逃避潜伏期第3、4、5天(18.95±14.96vs54.10±8.89,P<0.01;18.50±13.65vs53.00±10.22,P<0.01;22.10±19.69vs54.25±9.25,P<0.05)均有所缩短且差异有显著性。2.穿越平台次数CCH组较sham组减少(0.40±0.55vs2.20±0.84,P<0.05),NAD~+组较CCH组则有所增加(2.60±1.10vs0.40±0.55,P<0.05),差异均有统计学意义。3.目标象限游泳时间百分比CCH组与sham组比较显著减少(39.33±3.83vs25.67±2.79,P<0.01),NAD~+组较CCH组则有所增加(40±6.97vs25.67±2.79,P<0.05)。4.BCCAO后即刻脑血流降低为基线脑血流的(73.53±11.26)%,P<0.05;BCCAO后4周降低为基线脑血流的(71.81±9.16)%,P<0.01。5.CCH组NAD~+以及NADH总含量和sham组比较无明显差异,但NAD~+/NADH比值较sham组有所下降(P<0.05);NAD~+组大鼠NAD+和NADH总含量以及NAD~+/NADH比值较CCH组均有所升高(均P<0.05)。6.各组大鼠NAD~+/NADH比值与穿越平台次数呈spearman正相关(P<0.001),NAD~+/NADH比值与目标象限游泳时间百分比呈pearson正相关(P<0.01)。7.CCH组LC3B、PINK1、Parkin、APP(均P<0.05)和P62、TOMM20(均P<0.01)表达水平均高于sham组;NAD~+组APP(P<0.01)和TOMM20、LC3B、P62(均P<0.05)表达水平均低于CCH组;NAD~+组SIRT1(P<0.05)和PGC-1α(P<0.001)表达水平均高于CCH组。结论1.CCH老年大鼠空间学习记忆能力明显下降,补充NAD~+后老年CCH大鼠认知功能改善。2.NAD~+的认知保护作用可能与NAD~+抑制线粒体自噬过度激活,平衡自噬降解功能有关。3.NAD~+可通过SIRT1-PGC-1α途径调控PINK1/Parkin依赖的线粒体自噬通路,在CCH大鼠认知功能障碍中起保护作用。