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目的:探讨铁过载(iron overload,IO)对临床患者以及小鼠免疫细胞的影响。方法:根据特点收集临床铁过载患者外周血,并收集正常人外周血作为对照组。用流式细胞术分析外周血CD3+T及CD4/CD8比值,CD3+CD8-IFN-γ+(Th1)细胞、CD3+CD8-IL-4+(Th2)细胞,CD3+CD8+IFN-γ+(Tc1)细胞、CD3+CD8+IL-4+(Tc2)细胞;腹腔注射右旋糖酐铁建立小鼠铁过载模型,用流式细胞术分析小鼠及外周血CD3+T、CD4/CD8比值及B220+B淋巴细胞比例;进一步检测小鼠外周血Th1细胞、Th2细胞以及Tc1细胞、Tc2细胞;用流式细胞仪检测脾脏CD8+T淋巴细胞比例以及IFN-γ、TNF-α、Granzyme-B、perforin细胞因子的分泌情况,Annexin/PI标记检测细胞的凋亡情况。免疫磁珠分选小鼠脾脏细胞得到CD8+T淋巴细胞,RT-PCR检测CD8+T淋巴细胞的IFN-γ、TNF-α、Granzyme-B、perforin、bcl-2、bax基因表达。活性氧试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果:1.铁过载患者淋巴细胞内LIP水平明显增长,CD3+T淋巴细胞ROS明显上升,P值均<0.05。2.铁过载患者与对照组对比外周血中CD3+T淋巴细胞比例明显下降,CD4/CD8比值则明显上升;Th1/Th2比值以及Tc1/Tc2比值明显下降,P值均<0.05。3.脾脏铁染色及流式细胞术检测LIP水平均提示发生小鼠发生铁过载。4.与对照组相比铁过载组小鼠外周血中CD3+T淋巴细胞中ROS明显上升,P<0.05。5.与对照组相比,铁过载组小鼠外周血淋巴细胞计数以及比例(%)明显降低,P值均<0.05,中性粒细胞比例(%)明显上升P<0.05,但绝对数计数无明显变化。6.与对照组相比,铁过载组小鼠外周血中CD3+T淋巴细胞比例(%)显著下降,但CD4/CD8比值明显上升,P值均<0.05。7.与对照组相比,铁过载组小鼠外周血Treg细胞比例(%)显著上升,Th1/Th2比值以及Tc1/Tc2比值明显下降,P值均<0.05。8.与对照组相比,铁过载组小鼠外周血CD3+CD8-T淋巴细胞凋亡率显著上升;与对照组相比,铁过载组小鼠外周血CD3+CD8+T淋巴细胞凋亡率显著上升,P值均<0.05。9铁过载组小鼠脾脏中CD8+T淋巴细胞内ROS水平约为对照组的1.73倍。显著增加P<0.05。10与对照组相比,铁过载组小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞比例(%)降低为对照组的0.52倍,P<0.05。11与对照组相比,铁过载组小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞分泌的IFN-γ,Granzyme-B明显降低;小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ(x10-4)基因表达Granzyme-B基因表达显著下降,P<0.05。12与对照组相比,脾脏CD8+T淋巴细胞凋亡率(%)明显增高,P<0.01;脾脏CD8+T淋巴细胞中bcl-2基因表达明显下降,而bax基因表达(x10-2)明显上升,P<0.01。13上述铁过载对小鼠淋巴细胞的作用可经祛铁以及抗氧化治疗后可部分逆转。结论铁过载通过上调ROS影响患者及小鼠外周血淋巴细胞比例,抑制CD3+T的比例,上调CD4/CD8比值,下调Th1/Th2比值以及Tc1/Tc2比值,增加CD3+CD8-T淋巴细胞以及CD3+CD8+T淋巴细胞凋亡率,去铁以及抗氧化治疗后可部分逆转。铁过载可通过上调脾脏CD8+T淋巴细胞内ROS抑制脾脏的CD8+T淋巴细胞IFN-γ,Granzyme-B基因表达,并抑制IFN-γ,Granzyme-B蛋白的分泌。另一方面,铁过载可通过上调脾脏CD8+T淋巴细胞内ROS诱导增加CD8+T淋巴细胞的凋亡,对凋亡基因bax起上调作用,而对bcl-2基因有抑制其表达的作用。