探讨安脑平冲方对脑出血大鼠神经细胞自噬的影响

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目的:研究安脑平冲方对脑出血后大鼠神经细胞自噬的作用及机制。方法:参照随机数字表法将96只SD大鼠分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方高剂量组。采用鼠尾状核注入法制作脑出血模型,每组下设12h、1d、3d、7d4个亚组,术后各组给予相应药物灌胃,2次/d,假手术组、模型组均给予同等剂量蒸馏水灌胃。然后在相应时间点断头取脑组织,依据量表进行各组大鼠各时间点神经功能缺损评分、HE染色法观察大鼠脑组织形态学改变、Western Blot法检测脑组织中Beclin 1、LC3A、LC3B蛋白的表达。结果:1.神经功能缺损评分:与假手术组比较,模型组各时间点神经功能缺损评分均显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药低剂量组、中药高剂量组第12h、1d、3d、7d神经功能缺损评分均显著降低(P<0.05)。2.HE染色:假手术组神经细胞密集,排列整齐,神经元胞浆丰富,淡染,胞核居中,核仁清楚,胞浆无红染,细胞周围间隙致密无水肿。模型组可见神经细胞坏死、水肿以及胶质细胞的增多和神经元的减少、变性,其中坏死的神经细胞主要表现为核固缩、空泡形成。低、高剂量组12h可见不同程度的细胞水肿、神经纤维溃变及炎性细胞浸润,出现变性细胞及坏死细胞,随着给药时间的延长,水肿程度及炎症反应逐渐降低,高剂量组第3天可见少量细胞轻度水肿,炎症细胞减少,高剂量组、低剂量组效果差异不明显。3.Western Blot检测:(1)与假手术组比较,模型组、安脑平冲方低、高剂量组Beclin 1均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,模型组大鼠在同一时间点Beclin 1的表达升高,并随时间延长升高越明显,直至7d;与模型组比较,安脑平冲方低剂量组、高剂量组第1d、3d、7d Belin 1的表达明显降低(P<0.05),安脑平冲方组低剂量组、高剂量组第3d降低最明显(P<0.01)。(2)与模型组比较,安脑平冲方低、高剂量组LC3A、LC3B蛋白表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与安脑平冲方组低剂量组相比安脑平冲方高剂量LC3A、LC3B蛋白表达差异不明显,差异不具有统计学意义(P>0.05)。(3)与模型组比较,安脑平冲方低、高剂量组LC3B蛋白表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与安脑平冲方组低剂量组相比安脑平冲方高剂量LC3B蛋白表达差异不明显,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:1.安脑平冲汤可改善脑出血大鼠神经功能缺失评分,减轻脑水肿,发挥脑神经保护的作用。2.可能机制:安脑平冲方通过抑制血肿周围神经细胞自噬改善脑出血。3.安脑平冲方在调节自噬改善脑出血方面的量效关系不显著。
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