论文部分内容阅读
目的观察皮下注射干扰素α(IFN-α)对二乙基二硫代氨基甲酸盐(DDC)反复腹腔内注射诱导的大鼠胰腺纤维化模型的胰腺组织纤维增生程度的影响，并通过研究胰腺星状细胞(PSC)活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和细胞外基质(ECM)成分Ⅲ型胶原的蛋白表达，探讨IFN-α对大鼠胰腺纤维形成的作用及其对纤维化过程中PSC活化、增殖和胶原表达的影响，并探讨其可能的作用机制。方法雄性Wistar大鼠40只，体重200～250g，随机分成三组，对照组10只，模型组和干扰素组各15只，通过连续6周每周2次腹腔内注射DDC诱导大鼠胰腺纤维化模型，对照组大鼠每周2次腹腔内注射等量生理盐水共用6周。干扰素组在造模同时每只每天皮下注射IFN-α10万U，模型组和对照组每只每日等量生理盐水皮下注射。6周末三组动物同时取材，胰腺组织10％中性甲醛固定、石蜡包埋，切片经常规H-E染色和胶原特异性染色即Masson三色染色，光镜下观察胰腺组织的病理学变化并对胰腺纤维化程度行病理学评分。用免疫组化(SABC)法测定胰腺组织中α-SMA和Ⅲ型胶原蛋白的表达并进行计算机显微图像分析。结果实验前，三组大鼠的体重无统计学差异(P＞0.05)，实验开始后模型组和干扰素组大鼠体重增长缓慢，一周后即与对照组有显著性差异(P＜0.05)，从第四周开始模型组大鼠体重不升反降，五周后模型组体重即明显低于干扰素组，二者差异有显著性(P＜0.05)。模型组胰腺组织纤维增生、胶原沉积、腺泡萎缩和空泡变性等纤维化表现明显，干扰素组上述纤维化表现较轻，且纤维增生主要表现在小叶间，纤维化评分干扰素组亦显著低于模型组(P＜0.05)，对照组胰腺组织仅个别有炎细胞浸润或出血，无纤维化表现。免疫组化染色显示Ⅲ型胶原对照组呈阴性表达，模型组和干扰素组均呈阳性表达且主要位于腺泡周围呈网格状包绕腺泡，计算机显微图像分析结果显示干扰素组Ⅲ型胶原蛋白表达量较模型组明显减少(P＜0.05)。α-SMA免疫组化染色显示对照组仅见于血管及导管壁，而模型组和干扰素组除血管及导管壁外主要见于胰腺小叶间质及腺泡旁，显微图像分析结果显示干扰素组α-SMA蛋白表达量较模型组明显减少(P＜0.05)。结论本研究结果显示，在DDC诱导大鼠胰腺纤维化的同时给予IFN-α每只每日10万U皮下注射能显著减轻胰腺纤维化的程度，减少Ⅲ型胶原和α-SMA的蛋白表达，说明IFN-α对DDC诱导的大鼠胰腺纤维化有一定的预防作用。而此作用可能是通过抑制PSC活化，减少Ⅲ型胶原等ECM蛋白表达，并增加基质金属蛋白酶的活性，促进胶原等ECM蛋白降解而实现的，但其确切的作用机制有待进一步研究。