TrxG家族和PcG家族是染色质水平调控中起重要作用的基因家族。该两个家族多个成员通过对组蛋白进行共价修饰，打开或者关闭某些区域染色质结构，从而在染色质水平上进行表达调控，此为表观遗传调控(Epigenetic developmental control)的重要内容。在前期研究中，本研究组鉴定得到一个新的具有PHD结构域的TrxG家族基因ASH2L(Absem small homeotic 2 like)。研究发现，该基因在造血组织及多种白血病来源的细胞系中高表达，并在K562所代表的白细胞分化阶段起重要作用。但目前尚不清楚人ASH2L功能的具体机制及细节。 我们拟通过酵母双杂交技术寻找与ASH2L相互作用蛋白，以提示其功能线索。通过酵母双杂筛选HeLa细胞cDNA文库，得到与ASH2L相互作用蛋白的基因，即低等生物X染色体剂量补偿机制(X Chromosome dosage compensation)中DPY-30的同源基因，DPY-30-like。进一步通过蛋白质体外亲和实验(Pulldown)、免疫共沉淀(CoIP)和哺乳细胞免疫荧光共聚焦实验(Confocal)对ASH2L／DPY-30-like之间的相互作用进行了验证。结果确证了二者之间的相互作用是真实存在的。 为了解ASH2L／DPY-30-like相互作用的细节，我们对ASH2L基因以及DPY-30-like基因进行了分段原核表达。主要针对ASH2L上两个结构域(PHD和SPRY)以及DPY-30-1ike上的Dpy-30 motif对其进行划分。用分段表达的蛋白进行体外亲和实验表明，其相互作用均发生于两种蛋白的C-端区域，且与ASH2L上的PHD结构域无关。 低等生物如酵母的SET1蛋白复合体中，有两个成员分别包含了PHD和SPRY结构域，而在高等生物如果蝇中，该两个基因融合成一个基因即Ash2，而ASH2L正是Ash2的同源基因。同时研究已经明确了人SET1复合体的三个重要成员，其中均包括ASH2L。由于ASH2L和DPY-30-like的相互作用，由此可推测DPY-30-like可能是该复合体的一个新成员。为证明ASH2L所在复合体的甲基化酶活性能，我们通过免疫沉淀捕获核抽提物中的ASH2L及其相互作用蛋白，并检测了其H3-K4甲基化酶活性，结果证明ASH2L所在复合体确实存在该酶活性。为进一步证明ASH2L／DPY-30-like复合体在体内的活性，我们同时实施了ChIP实验，证明该ASH2L／DPY-30-like所在复合体确实能对靶基因进行H3-κ4的甲基化修饰。